石 蕊,王玉贤,杨海澜

    近些年来,有多种的研究表明,神经干细胞在胚胎[1]和成年哺乳动物中枢神经系统的不同部位比如脊髓、海马、纹状体[2]等都有存在,它是一群具有自我更新和多向分化潜能的细胞,它的发现为人们深入研究中枢神经系统的发育、分化以及探索治疗神经系统疾病的新途径开辟了新的思路。出生后胎儿功能健全的神经系统对于胎儿、家庭和社会都具有极其重要的意义。但是胎儿在母体期间,会受到多种环境因素的影响,例如药物[3]、病毒[4]、细菌、宫腔感染释放的各种感染因子[5]等等,这些因素对胎儿身体,尤其是大脑发育可能会造成不可逆的影响。本研究在胚胎神经干细胞体外培养模型的基础上,检测γ干扰素(IFN-γ)这一常用炎症因子对胚胎神经干细胞的影响。现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 实验用孕14 d～16 d Wistar大鼠由上海交通大学医学院实验动物中心提供。所有的实验操作均按照美国国家研究委员会1996年制定的“实验动物使用和保护指南”和上海交通大学医学院动物保护和使用委员会制定的“鼠类生存手术指导方针和政策”执行。

    1.2 实验方法

    1.2.1 神经干细胞的分离和培养 取孕16 d胚龄的SD大鼠,经乙醚麻醉,常规消毒后取其胚胎,于显微手术镜(Lecia)下剥离大脑半球及脊髓组织,分别置于L15培养液(GIBcoBRL公司)中,吹打成细胞悬液。收集细胞悬液过尼龙筛网后,离心并重悬于无血清的神经干细胞基础培养液DFNG(DMEM/F12培养液、N2、谷氨酰胺,GIBcoBRL公司)中,按1×105/mL密度种瓶,同时添加碱性成纤维生长因子(bFGF,GIBcoBRL公司)和表皮生长因子(EGF,Sigma公司,终浓度均为20 μ g/L),于 5%CO2,37℃细胞培养箱中培养 ......