杨丰兵,李新毅,穆俊霞

    载脂蛋白E(Apo E)基因位于19q13.2上,3种常见的等位基因ε 2、ε 3和ε 4分别编码产生3种主要的Apo E异构体 Apo E2、Apo E3和Apo E4[1]。Apo E参与机体血脂代谢及调节胆固醇平衡,在动脉粥样硬化的发生和神经损伤的修复中起着重要作用[2],它与血管性认知障碍的关系目前研究很少,有必要对脑梗死病人Apo E基因多态性进行研究,并分析其对认知功能障碍的影响。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 随机选取山西医科大学第一医院2009年5月—2009年11月新入院的脑梗死病人240例为脑梗死组,其中男139例,女101例,年龄(67.65±7.86)岁。诊断符合全国第四届脑血管病学术会议修订的诊断标准[3],并经头颅CT/磁共振成像(M RI)确诊;排除栓塞性、感染性因素及其他非血管因素所致卒中,另外除外意识障碍、失语及有精神障碍不能配合认知功能检查的病例。并同期收集山西医科大学第一医院门诊体检中心健康体检者150名作为对照组。其中男92名,女58名,年龄(65.38±7.36)岁。两组年龄、性别差异无统计学意义。

    1.2 方法

    1.2.1 基因组DNA的提取 采集空腹静脉血2 mL,用EDTA-Na2抗凝,用DNA提取试剂盒提取基因组DNA。

    1.2.2 引物设计 参照文献[4]方法,用等位基因特异性多重聚合酶链反应(ARMS-PCR)方法检测ApoE基因多态性。设计上游引物序列(由宝生物工程大连有限公司合成):P1,5′-CGCGGACATGGAGGACGT TT-3′,P2,5′-CGCGGACATGGAGGACGT TC-3′,分别检测 ApoE112位的半胱氨酸(Cys)和精氨酸(Arg);P3,5′-ATGCCGATGACCTGCAGAATT-3′,P4,5′-ATGCCGATGACCTGCAGAATC-3′,分别 检测 ApoE158位的 Cys和 Arg;设 计 公 共 下 游 引 物 为 P5,5′-GTTCAGTGATTGTCGCTGGGCA-3′;引物 P1与 P5、P2与 P5扩增出的片段为588 bp,P3与P5、P4与 P5扩增出的片段为451 bp ......