淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠血清NO、MPO的影响1)
内皮,1材料与方法,2结果,3讨论
蔡 辉,郭郡浩,董晓蕾,蔡佳宇,赵智明高胆固醇血症和高三酰甘油血症诱导内皮损伤,最终导致动脉粥样硬化(AS)形成,其高三酰甘油血症引起血管损伤主要由于一氧化氮(NO)的生物利用度下降,出现氧化应激[1],损伤内皮细胞,加剧AS的炎性反应,激活转录因子κ B。髓过氧化物酶(MPO)水平与中性粒细胞激活程度之间存在极显著的相关性,是中性粒细胞的活化标志物,调节NO对血管信号传递和舒张的作用,直接改变血管的炎症反应性[2]。淫羊藿总黄酮为黄铜类化合物,其主要生物活性成分可改善内皮细胞、抗氧化等功能[3],对心血管系统存在潜在保护作用。本文就淫羊藿总黄酮减轻主动脉内皮氧化应激、炎症损伤的作用进行研究。
1 材料与方法
1.1 实验动物和分组 实验动物为刚断乳的SD雄性大鼠35只,平均体重60 g左右,由南京军区南京总医院动物实验中心提供,实验动物使用许可证号SYXK(苏)2003-0032;淫羊藿总黄酮由南京泽朗医药公司合成。
所有大鼠适应喂养1周,根据体重随机分为配方高脂饲料(鱼粉3%、猪油12%、白蔗糖 5%、鸡蛋 10%、胆固醇 2%、胆酸盐0.5%、甲基硫氧嘧啶0.2%和67.3%基础饲料)组(26只)和普通饲料组(对照组,9只),高脂饮食组进食量控制在15 g/100(g?d),第12周末从大鼠眶后静脉抽血检测血脂以确定模型是否复制成功。再将高脂饮食组大鼠根据体重随机分为模型组(8只)和高脂饮食加100 mg/kg淫羊藿总黄酮组(低剂量淫羊藿总黄酮组,9只)、高脂饮食+200 mg/kg淫羊藿总黄酮组(高剂量淫羊藿总黄酮组,9只)。12周后给予连续灌胃,干预4周。对照组和模型组予相应溶剂灌胃,均灌胃4周。药物干预4周后处死大鼠。实验结束后,禁食24 h,于次日08:00时,用20%氯胺酮,以1 mL/100 g剂量麻醉后,剪开胸腹腔,暴露心脏,左心室穿刺取血5 mL,室温静置1 h后,3 000 r/min离心5 min,分离血清置-20℃冰箱保存,待测血清指标;于冰盘中分离主动脉,置液氮中保存待测其他指标。
1.2 检测指标和方法
1.2.1 血脂和生化指标检测 三酰甘油(TG)用TPO-PAP法,总胆固醇(TC)用CHOD-PAP法,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)用选择性沉淀法,NO用硝酸还原法,MPO用邻连茴香胺法,严格按试剂盒说明进行操作,试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供 ......
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