袁爱红,蔡 辉

    脂联素(adiponectin,APN)是白色脂肪组织分泌的细胞因子,对脉管系统有良性作用[1,2]。研究显示,APN具有直接的抗动脉粥样硬化的作用[3-8],对细胞间黏附分子-1、血管细胞间黏附分子-1和E选择素等黏附分子的表达具有很强的抑制作用;能够抑制巨噬细胞清道夫受体CA-1的表达,导致巨噬细胞氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)吸收明显降低、抑制泡沫细胞的形成[6];能够削弱平滑肌细胞中生长因子诱导的DNA合成[7],造成通过ERK信号转导的抑制;APN的高聚体(HMW)形式通过激活AMPK能够选择性地抑制内皮细胞的凋亡[8]。APN与脂联素受体(AdipoR)结合后发挥各项生理功能。研究发现,AdipoR1和AdipoR2在同组织同影响条件下表达有不同。为了探讨AdipoR不同亚型在高脂饮食机体主动脉表达的变化以及针刺对该变化的影响,本研究采用实时荧光RT-PCR技术检测了高脂饮食诱导的高脂血症大鼠主动脉AdipoR1和AdipoR2的基因表达情况。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 为刚断乳的SD雄性大鼠26只,体重54 g～69 g,由南京军区南京总医院动物实验中心提供[许可证号SYXK(苏)2003-0032]。

    1.2 实验方法 所有SD大鼠均适应性喂养1周,根据体重随机分为自配方高脂饲料组(17只)和普通饲料组(对照组,9只),喂养12周后,空腹过夜,球后静脉取血 3 mL,室温静置1 h后,3 000 r/min离心5 min,分离血清置-20℃冰箱保存,测血脂四项、一氧化氮(NO)和髓过氧化物酶(M PO)。然后根据体重将高脂饲料组大鼠随机分为模型组(8只)和针刺组(9只),干预 4周。针刺组:选取后三里、内庭、心俞三穴,进针后,每穴快速行针1 min,后三里和内庭接通G6805Ⅱ型电针仪连续波15 min,强度1 mA,频率10 Hz。每次选取一侧肢体,两侧轮流,周一到周六治疗,周日休息,连续4周。实验期间所有大鼠均自由摄食饮水,每周测1次身长、体重。

    1.3 观察指标和方法 实验结束后,禁食24 h,于次日8:00用20%氯胺酮,以1 mL/100 g剂量麻醉后,剪开胸腹腔,暴露心脏,心脏取血5 mL,血液样品处理同上,然后于冰盘中分离主动脉,置液氮中保存待测各项指标。三酰甘油(TG)用TPO-PAP法,总胆固醇(TC)用CHOD-PAP法,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)用选择性沉淀法,NO用硝酸还原法,MPO用邻连茴香胺法,主动脉AdipoR1和AdipoR2基因检测用实时荧光RT-PCR法 ......