翟俊格,李常新,吴晓巍,王慧芳,祁玉凤,高润兰

    众所周知,脑卒中好发于秋末冬初。在寒冷季节,尤其是气温骤降时,发病明显增多[1],提示寒潮可能影响某些与发病相关的因子,使之发生变化而致病。因此寻找寒潮诱发脑卒中的发病因素,对其防治具有重要的临床意义。本研究通过建立易卒中型肾血管性高血压大鼠(stroke-prone renovascular hypertensive rats,RHRSP)模型并模拟自然界寒潮,观察脑卒中发生情况,采用免疫组化方法检测大鼠脑组织内皮素(endothelin,ET)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)、组织因子(tissue factor,TF)及血栓调节蛋白(Thrombomodulin,TM)变化,探索寒潮诱发脑卒中可能的发病机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与模型制备 选用健康的雄性封闭群Sprague Dawley(SD)大鼠 120只,鼠龄 60 d～ 90 d,体重 80 g～ 120 g,由山西医科大学动物实验中心提供。以颗粒型大鼠饲料喂养,饮用自来水,动物房温度控制在20℃左右,光暗周期24 h,为正常昼夜节律。80只大鼠用双肾双夹法复制RHRSP模型[2];40只采用开腹分离肾动脉、不夹闭的假手术方法,其余操作步骤同模型复制。

    1.2 神经行为学评分 按Longa 5分制法由2人同时对大鼠进行行为学评分。规定Longa评分≥1分为脑卒中。

    1.3 血压测定与动物分组 用SDP-1型大鼠心率血压计(中日友好医院研制)测量大鼠尾动脉收缩压,术前3 d连续测血压作为基础血压,术后每 2周测血压1次,观察 12周。术后 2周血压较术前增高20 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)以上为模型复制成功标准。随机从复制成功的RHRSP模型中取出36只作为高血压组,在假手术方法大鼠中选36只作为假手术组。

    在术后12周时,剔除饲养过程中Longa评分≥1分的4只大鼠(已发生脑卒中),从复制成功的76只 RHRSP模型中选取Longa评分为0、体重 270 g～330 g的RHRSP大鼠60只,随机分为寒潮组和非寒潮组,每组均为30只。

    1.4 人工模拟寒潮 按照气象局规定的标准,寒潮定义为日平均气温在24 h内急剧降温8℃或以上(48 h内降温10℃或以上),而且整个过程最低气温≤5℃ ......