缺氧诱导因子-1α在大鼠血栓闭塞性脉管炎模型中的表达(1)
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摘要：目的观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠血栓闭塞性脉管炎模型中的表达规律，并探讨其临床意义。方法月桂酸钠注射法建立Wistar大鼠血栓闭塞性脉管炎模型，ELISA法检测造模前后血清中HIF-1α水平，免疫组化法半定量检测造模后健侧与患侧肌肉组织中HIF-1α的表达，结合临床病理探讨其临床意义。结果与术前相比,造模组大鼠术后血清中HIF-1α水平明显升高(P<0.05);与健侧相比,患侧肌肉组织中HIF-1α表达水平明显增高(P<0.05);随着缺血时间延长,血清中HIF-1α及患侧肌肉组织中HIF-1α表达水平呈下降趋势。结论HIF-1α在大鼠血栓闭塞性脉管炎模型缺血骨骼肌及血清中早期高表达，并随缺血时间延长而逐渐下降，可能在血栓闭塞性脉管炎的发生发展中起了一定的作用,并可作为血栓闭塞性脉管炎诊断分期及疗效判断的指标之一。
关键词：血栓闭塞性脉管炎 缺氧诱导因子 缺血
中图分类号：R543.4文献标识码：A文章编号：1672-1349(2011)05-0593-02
Expression of HIF-1α in Rat Model with Thromboangitis Obliterans
Wang Liwei，Yang Tao，Cao Wendong，et al// Shanxi Medical University(Taiyuan 030001)
Abstract：ObjectiveTo observe the expression pattern of hypoxia inducible factor-1α(HIF-1α) in the rat model with thromboangitis obliterans.MethodsWistar rat model with thromboangiitis obliterans were established by sodium laurate injection.Serum concentration of HIF-1α was detected by ELISA assay.HIF-1α expressions of muscle tissues were detected by semi-quantitative immunohistochemistry.ResultsCompared with pre-operation，HIF-1α serum concentration in models was significantly increased (P<0.05).The muscle tissue expression of HIF-1α in average gray value in modeling side was statistically increased compared with that in contralateral side (P<0.05).ConclusionThe expression of HIF-1α in the rat model with thromboangiitis obliterans significantly higher early and then decreased gradually.HIF-1α might play a role in the development of thromboangiitis obliterans，and it could be used as one of the clinical indicators to evaluate the thromboangiitis obliterans.
Key words：thromboangiitis obliterans；hypoxia inducible factor-1α；ischemia
血栓闭塞性脉管炎(TAO)是常见的外周血管缺血性疾病之一，以侵犯四肢血管为主的全身性非化脓性动静脉炎性疾病[1，2]。本课题旨在研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠血栓闭塞性脉管炎模型中的表达规律并探讨其临床意义。
1材料与方法
1.1材料与试剂Wistar大鼠35只，雄性，体重400 g～550 g,山西医科大学生理教研室提供；月桂酸，北京市旭东化工厂；缺氧诱导因子-1α酶联免疫试剂盒，上海西塘生物科技有限公司。缺氧诱导因子-1α免疫组化试剂盒，武汉博士德公司。
1.2方法
1.2.1大鼠造模及分组Wister大鼠35只，随机分为假手术组及1 d、3 d、1周、2周、3周、4周造模组，每组5只。术前均留取血清标本，参照文献方法稍加改进[3,4]，制作大鼠血栓闭塞性脉管炎模型。术毕给予青霉素40×104U腹腔注射，预防感染。按照造模时间分批处死，假手术组于4周时处死，处死前留取术后血清标本，并取左右后肢造模处周围肌肉组织。
1.2.2血清HIF-1α检测采用ELISA法检测术前与术后血清中缺氧诱导因子-1α浓度,按照试剂盒说明书进行。
1.2.3组织中HIF-1α检测免疫组化SABC法检测各组造模侧肢体血管及肌肉组织中缺氧诱导因子-1α的表达情况，健侧肢体作为对照，操作按照试剂盒说明书进行。HIF-1α蛋白以细胞核或胞浆中有棕黄色颗粒为阳性，无反应为阴性，在400倍视野下采用Cooled CCD采集图像，使用IPP软件测量表达平均灰度值。平均灰度值范围0～255 ......
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