新生大鼠缺氧缺血性脑损伤HIF-1α表达与细胞凋亡的关系及干预研究
-甲氧基雌二醇,缺氧诱导因子-,Caspase-
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郭晋伟 阴怀清 闫焕利 范泽卫 杜洪 山西医科大学;山西医科大学第一临床医学院;
【摘要】目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后及2-甲氧基雌二醇(2ME2)干预后对脑组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达趋势的变化与细胞凋亡的关系,探讨2ME2对HIBD的影响及可能的作用。方法将7d龄Wistar大鼠120只,随机分为假手术组、HIBD组及2ME2干预组。其中后两组又根据HIBD后处死动物的时间不同随机分为7个亚组。采用免疫组化的方法对各组新生大鼠脑组织HIF-1α和Caspase-3的表达进行检测及用TUNEL法测定细胞凋亡指数(AI)。结果 HIF-1α正常情况下低水平表达,HIBD后12h达高峰,后逐渐降低;Caspase-3表达于HIBD后6h明显升高,2d时达高峰;细胞凋亡指数于HIBD后3h升高,随着观察时间的推移,逐渐增多。2ME2干预后各时间点HIF-1α和Caspase-3的表达水平及细胞凋亡指数均较HIBD组明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HIBD后HIF-1α表达增高,诱导细胞凋亡,促进了HIBD的进展;2ME2干预后,抑制了HIF-1α的表达,从而发挥脑保护作用。
【关键词】 缺氧缺血性脑损伤 新生大鼠 -甲氧基雌二醇 缺氧诱导因子- Caspase- 细胞凋亡
【基金】山西省回国留学人员科技基金资助项目(No.2011-095) 山西省卫生厅科技攻关基金项目(No.2011018)
【分类号】R722.1
新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopa-thy,HIE)为新生儿期常见疾病之一,是围生期窒息导致脑缺氧缺血性损害,引起新生儿急性死亡和慢性神经系统损伤的主要原因之一。缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)是一种氧敏感转录激活因子[1]。以往研究显
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采用TUNEL法定量观察凋亡细胞，按试剂盒提供的实验步骤进行操作。光镜下观察，胞核出现棕黄色颗粒为阳性细胞，即凋亡细胞。高倍镜下(×400)在缺血侧皮质区随机选取10个非重叠视野，计数500个细胞，计算阳性率即凋亡指数(AI)，AI=阳性细胞数/观察细胞数×100%。
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