孔 瑜，兰丽珍，张继敏

    严重的糖尿病并发症糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)也已经成为引起终末性肾衰最重要的原因之一。免疫炎症反应在DN发生发展过程中发挥着极为重要的作用[1，2]。Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)是免疫反应重要的上游调节因子，可通过调控其下游信号核因子-κB(NF-κB)诱导炎症因子的表达，激活免疫炎症反应。骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是炎症反应中巨噬细胞重要的趋化因子。TLR4、OPN的表达参与糖尿病肾病的发展过程，且抑制其表达可以减少肾脏的损伤。胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是一种由肠道L细胞分泌的肠促胰岛素激素，Exendin-4是从动物唾液中分泌的天然GLP-1类似物，是一种新型降糖药物，其能够抑制免疫炎症反应，从而改善DN肾脏损伤，起到保护肾脏的作用。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂 HK-2细胞，来自于中国协和医科大学细胞中心，GLP-1类似物Exendin-4原粉由东莞宝丽健生物工程研究开发有限公司提供。免疫组化试剂盒购于武汉博士德生物有限公司。TLR4、OPN引物由上海生物工程有限公司合成。

    1.2 HK-2的培养及分组 体外培养HK-2细胞，用含8%的胎牛血清，1%复方氨基酸的DMEM低糖培养基。分组，低糖组(5.5mmol/L)，高 糖 组 (30mmol/L)，高 渗 透 压 组 (30 mmol/L甘露醇的DMEM培养基)，Exendin-4低剂量干预组(30mmol/L葡萄糖的DMEM培养基，10pmol/L Exendin-4)，Exendin-4中剂量干预组(30mmol/L葡萄糖的DMEM培养基 ......