杨秀丽，张文高，师 冉，郑广娟

    载脂蛋白E基因敲除(Apolipoprotein-E knockout，ApoEKO)小鼠能够在自然膳食下形成严重的高脂血症，并自发形成纤维斑块和复合斑块，病理学改变与人类极为相似，因此广泛应用于动脉粥样硬化(AS)的研究中[1]。本研究以ApoEKO小鼠为动物模型，研究脂欣康对海马形态学及胆碱乙酰转移酶(ChAT)与突触素(P38)表达的影响，为健脾益气法改善认知功能障碍提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 32周龄ApoEKO小鼠，30只，雄性，体重32.5 g±1.0g；32周龄C57BL/6J小鼠，10只，雄性，体重30.9g±1.2g，北京大学医学院动物科技部提供。

    1.2 药物与试剂 脂欣康胶囊由济南孟氏生物科技研究所有限公司生产，批准文号：卫食健字(2001)第0010号，生产批号：20041106；维生素E(VitE)由浙江医药股份有限公司新昌制药厂生产，生产批号：040323。DAB显色试剂盒、多聚赖氨酸，兔抗胆碱乙酰转移酶单克隆抗体，小鼠抗神经P38单克隆抗体，由武汉博士德生物工程有限公司提供。

    1.3 分组与给药 将30只ApoEKO小鼠随机分为ApoEKO组、脂欣康组、联合干预组，每组10只。分别给予生理盐水、脂欣康混悬液(0.008g/d)，脂欣康混悬液(0.008g/d)+VitE[100 mg/(kg·d)]灌胃；10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组，给予等量生理盐水灌胃。每日灌胃一次，连续给药60d。

    1.4 HE染色及光镜观察 取视交叉到乳头体部位的脑组织，按照常规浸蜡、石蜡包埋，HE染色，在光镜下观察拍照。

    1.5 图像采集与计算机定量分析 将石蜡切片置于37℃的烤箱内烘烤过夜，常规免疫组织化学ABC法。使用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统(武汉同济医科大学千屏影像工程公司)，在相同的背底倍体条件下选择相应的参数进行计算机完全定量分析，测定3个视域阳性细胞的平均灰度及阳性细胞率，代表蛋白表达水平。

    1.6 统计学处理 运用SPPSS13.0处理 ......