王 琳，祝美珍，肖艳芬，杨仕权，吴志敏，刘向阳

    脑缺血预处理(brain ischemic preconditioning，BIP)是指对脑组织采用机械刺激，如一次或多次短暂性脑缺血再灌注后，诱导脑组织产生内源性保护机制，使其对以后较长时间的缺血性损伤产生显著的耐受。近年来研究发现，微管相关蛋白1B(microtabule associated protein 1B，MAP1B)属于神经组织特异表达的蛋白质，是神经系统发育过程中最先表达的微管相关蛋白[1-3]，在分化成熟的神经系统中，一旦发生损伤，MAP1B也会高水平表达，通过调节轴突生长锥的生长方向、促进轴突的延长及再髓鞘化对 神经的生长 和 再 生 起 作 用[1，2，4-6]。 本 实 验 通 过 建立大鼠局灶性脑缺血预处理模型，从神经再生角度观察清热化瘀Ⅱ号方与BIP共同作用对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用，为临床缺血性脑卒中的治疗和二级预防提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物来源 SPF级健康SD大鼠126只，体重(250±50)g，广西医科大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号：SCXK桂2003-0003，使用许可证号：SYXK桂2003-0005。

    1.1.2 试剂来源 RNAprep pure(DP431)动物组织总RNA提取试剂盒(离心柱型)、TIANScript mRNA第一链合成试剂盒(KR104)、RNAstore样本保存液(DP408-01)均购自天根生化科技(北京)有限公司；EB溴化乙淀(M1421-1)购自上海凯博生物有限公司；西班牙琼脂糖(111860)购自上海川翔生物科技有限公司；MAP1B及β-actin引物均由生工生物工程(上海)有限公司设计合成，大小分别为292bp、432bp。

    1.2 方法

    1.2.1 药物制备 清热化瘀Ⅱ号方(水牛角、水蛭、赤芍、地龙、石菖蒲等12味中药组成)单味中药浓缩颗粒剂，江苏省江阴市江阴天江药业有限公司生产，批号：0904099。给药容积为14 mL/kg，其等效剂量按体表面积折算为14g/(kg·d)。

    1.2.2 动物模型的制备 采用大脑中动脉二次线栓法[7]制备大鼠脑缺血预处理模型，结扎大鼠左颈外动脉远端和颈总动脉近端，将前端用火焰烧圆的尼龙线从颈总动脉残端插入，进线约18mm～20mm，大脑中动脉栓塞 (middle cerebral artery occlusion，MCAO)后10min抽出线栓，完成预缺血 ......