李艳丽，张 策，张 虹

    谷氨酸是中枢神经系统重要的兴奋性神经递质。谷氨酸受体的活化在突触可塑性、学习和记忆中起重要作用[1]。在中枢神经系统，兴奋性突触传递主要由离子型谷氨酸受体介导。离子型谷氨酸受体包括AMPA受体、KA受体和NMDA受体[2]。

    NMDA受体为配体门控离子通道，在许多突触活动中起重要作用[3]。但是NMDA受体的过度活化，可引起细胞内钙超载，引发一系列酶的级联反应，并最终诱导神经元死亡，被称为“兴奋性神经毒”[4]。许多急性或慢性脑组织损伤性疾病都与NMDA受体介导的兴奋毒性有着重要的联系，比如中风、癫痫和某些神经变性疾病等[5]。数据显示NMDA型谷氨酸受体通道在创伤性脑损伤的病理生理过程中具有重要的作用[6]。而且NMDA受体的过度活化是创伤性脑损伤引起神经学缺陷的主要原因，NMDA受体拮抗剂可抑制这些症状[7]。

    传统上，细胞死亡被分为细胞坏死和凋亡。凋亡是一种程序化的主动性细胞死亡，且无炎症反应。坏死是病理产生的被动死亡，且这种细胞死亡方式会导致炎症物质的释放[8，9]。最近，Degterev等[10]研究发现，在细胞内不存在凋亡信号时，Fas/TNFR能活化一种非凋亡的死亡途径，称为坏死性凋亡。因同时具有坏死和凋亡的生化特征和超微结构特征而得名。同时。他们发现一种小分子物质 Necrostatin-1(Nec-1)，可以特异且有效地抑制坏死性凋亡，为坏死性凋亡的鉴别提供了一个有效的工具。迄今为止，坏死性凋亡的机制并不清楚，Nec-1的发现为评价坏死性凋亡的特征及作用提供了唯一的可能。因此，本研究通过观察Nec-1对NMDA诱导的兴奋毒的抑制作用，从而明确NMDA诱导的兴奋神经毒中是否存在坏死性凋亡。

    1 材料与方法

    1.1 试 剂 DMEM/F-12 和 胎 牛 血 清 (Gibco-BRL)；Cell Counting Kit-8(CCK-8)、calcein-AM(Dojindo)；NMDA、阿糖胞苷、MK-801、多聚赖氨酸、Nec-1(Sigma)；胰蛋白酶(Biosharp)；乳酸脱氢酶(LDH)(南京建成生物工程研究所) ......