张晓敏，李光来

    脑血管病是现实生活中危害人类生命健康的常见病和多发病，以其高发病率、高复发率、高致残率、高死亡率受到医学界的广泛关注。在脑血管病的治疗中，肢体反复短暂缺血预处理(LEP)在脑保护方面的研究是近年研究的热点之一，但对于其具体机制仍不十分明确和完善，因此进一步探讨肢体反复短暂缺血预处理在脑缺血再灌注损伤中的保护作用尤为重要。本课题通过观察肢体反复短暂缺血预处理时对大鼠脑缺血及缺血再灌注脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)及三磷酸腺苷(ATP)酶水平的影响，探讨其对脑缺血再灌注损伤的保护作用，为脑缺血患者的临床治疗提供一条安全、无创、有效的新途径，达到及时指导、早期治疗、提高患者生存率和生存质量的目的。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 在山西医科大学实验动物中心选取成年健康雄性Wistar大鼠42只，鼠龄3个月～4个月，体重200g～250g。

    1.1.2 实验分组 42只 Wistar大鼠，随机分为假手术组(A

    组)、脑缺血组(B组)、脑缺血再灌注组(C组)、LIP组(D组)。LIP组再分为4组：LIP 0h组(D1组)、LIP 6h组(D2组)、LIP 12h组(D3组)、LIP 24h组(D4组)，分别在LIP后即刻、6h、12h、24h行脑缺血再灌注。每组各6例。

    1.1.3 实验设备 721分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；TGL-16G高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)；电热恒温水浴锅(上海医疗器械厂)；XW-80A漩涡混合器(上海手术器械厂)；医用低温冰箱(日本三洋公司)；电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂)；JY98-ⅢN超声波破碎仪(上海京工实业有限公司)；光学显微镜(日本OLYMPUS公司)。

    1.1.4 主要试剂 微量MDA测定试剂盒、SOD测定试剂盒、超微量ATP酶试剂盒、考马斯亮蓝蛋白含量试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。普通试剂由山西医科大学实验中心提供。721分光光度计，其他试剂均为国产分析纯试剂。

    1.2 方法

    1.2.1 大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血再灌注模型的制备 采用改良Longa法[1]建立大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型。将大鼠用10%水合氯醛3mL/kg腹腔麻醉，颈正中右旁开0.5 cm～1cm切口，钝性分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉，结扎颈外动脉、颈总动脉近心端，在颈总动脉距离分岔口大约5 cm处用眼科剪剪开一小口，将直径0.236mm的进口鱼线插入 ......