黄连解毒汤对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用1)
低剂量,细胞因子,1材料与方法,2结果,3讨论
付晓春,陈建军,王舰平黄连解毒汤(HLJDT)源于唐·外台秘要[1],由黄连、黄柏、黄芩、栀子4味中药构成,近年来研究发现黄连解毒汤能明显改善脑缺血损伤[2,3],并且能显著降低胆固醇,改善血栓及血液黏滞性[4],提示黄连解毒汤对由于心肌缺血引起的心肌损伤具有保护作用。心肌损伤中的缺血再灌注损伤(I/R)是一个复杂的过程,研究发现炎症反应在心肌缺血再灌注损伤中起了非常重要的作用[5],故本实验旨在观察HLJDT在急性I/R过程中对血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、肌酸激酶(CK)及NF-κB表达的影响,探讨HLJDT在此过程中是否具有保护作用。
1 材料与方法
1.1 主要试剂 黄连解毒汤的制备:取黄连、栀子、黄柏、黄芩4味药(1.5∶1.5∶1∶1)加水煮沸,合并3次药液,恒温100℃浓缩制成黄连解毒汤,每毫升含生药5g。复方丹参片(FFDS)广州白云山制药总厂中药厂,批号:090607)。实验中所用的缓冲液均由国产分析纯级试剂配制。TNF-α、IL-1ΒELISA试剂盒购自武汉博士德。
1.2 动物模型及分组 健康雄性SD大鼠56只,体重250g~300g,随机等分为7组[6,7],每组8只。假手术组、心肌缺血再灌注组,溶剂(1%CMC-Na)对照组;黄连解毒汤(HLJDT)高、中、低剂量组(200mg/kg、400mg/kg及800mg/kg),复方丹参组(500mg/kg)。连续给药7d,缺血再灌注不作药物处理,末次给药24h后,腹腔注射戊巴比妥钠4.5mg/100g,麻醉动物后行气管切开接微型呼吸机人工呼吸,呼吸频率60次/min,潮气量2mL/100g。沿胸骨左缘第4肋骨开胸在左心室、右心室与左心房交界处结扎/开放左冠状动脉前降支,建立心肌缺血再灌注模型。假手术组丝线穿过冠状动脉前降支但不结扎。30min后放开丝线恢复冠脉再通40min。
1.3 观察指标和检测方法
1.3.1 血清 TNF-α、IL-1β、CK水平的测定 实验终点 ......
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