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编号:230743
中风膏对大鼠脑缺血再灌注损伤脑梗死体积及细胞凋亡的影响1)
闁稿繑濞婇弫顓犳嫚瀹ュ繒绐�小剂量,1材料与方法,2结果,3讨论

     刘志军,杨瑞龙,杨 涛,胡敏棣,窦友义,张 谦,赵俊喜

    中风膏是在古方“佛手散(当归、川芎)”基础上重用岷当归(达药典规定的6倍),配伍赤芍、黄芪、水蛭、羌活和甘草等制成,具有活血化瘀及调节免疫功能的作用[1],对中风有良好临床疗效[2,3]。本研究旨在探讨中风膏对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及抗凋亡机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物、药品和主要试剂 健康雌雄各半SPF级SD大鼠140只,体重280g~320g,鼠龄3~4个月。购于甘肃中医学院科研实验中心,许可证号:SCXK(甘)2004-0006。

    中风膏为甘肃省中医医院院内制剂,由医院制剂室提供。药品批文号:甘药制字Z04000839,生产批号:20090412。配方:岷当归、川芎、赤芍、黄芪、水蛭、羌活、甘草等。工艺:将岷当归精馏后,取当归药渣与川芎、赤芍、黄芪、水蛭、羌活、甘草混合,经水提、醇沉、过滤、浓缩后与当归精馏产生的挥发油混合,灭菌制成膏剂,成品包装。规格:10g。每克相当于生药9g(依据中华人民共和国药典2000年版)。

    脱氧核苷酸末端转移酶介导的DNA原位末端标记法(TUNEL),原位细胞凋亡检测成套试剂盒由德国罗氏公司提供。2,3,5-三苯基四氮唑(TTC)由武汉博士德生物科技有限公司提供。

    1.2 动物分组及处理 用数字表法将大鼠随机分为假手术组(15只),模型组、中风膏大剂量组、中风膏小剂量组,各35只。除假手术组外,各组又分为TTC染色组及凋亡检测组,TTC染色组再随机分为缺血再灌注24h、48h及72h3个时间点,凋亡组随机分为缺血再灌注4h、24h、48h和72h4个时间点,各个时间点5只。

    给药方法:中风膏大、小剂量分别为1.8g/(kg·d)和0.9 g/(kg·d)。造模前连续灌胃7d及再灌注1h后灌胃给药,每天上午、下午各一次;模型组每次予以同等容积生理盐水灌胃。1.3 造模方法 参照Longa等[4]线栓造模方法并进行部分改良建立大鼠右侧脑缺血再灌注模型。手术分离右侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA),结扎并切断颈外动脉及其分支 ......

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