武建才，赵克斌，胡 敏

    华法林是一种香豆素类口服抗凝药，具有抗凝和溶栓的双重作用。但由于华法林抗凝治疗窗窄，抗凝不当很容易导致出血或栓塞，甚至危及病人生命。因此，如何在临床上合理有效使用华法林长期以来一直是临床医生关注的重点和难点。近年来随着药物基因组学研究的不断深入，大量研究表明，CYP2C9和VKORC1基因多态性是造成个体间华法林稳定剂量差异的主要原因，故本研究旨在结合非遗传因素探讨山西地区汉族人群CYP2C9*3(1075A>C)和 VKORC1(-1639G>A)基因型分布特点及对华法林日均维持剂量的影响，从而辅助临床医生指导患者个体化华法林的使用。

    1 资料与方法

    1.1 研究对象 收集2012年1月——2012年7月到山西医科大学第一医院复查抗凝指标的服用华法林抗凝患者179例(病例组)，其中男84例，女95例，年龄(53.93±12.12)岁，体重指数(BMI)22.61 kg/m2±3.40 kg/m2。对照组为同期到我院门诊健康体检者150名，男72名，女78名，年龄(52.98±13.20)岁，所有入选对象均来自山西地区的汉族居民，相互间无血缘关系及异族通婚史。入选标准：年龄≥18岁、稳定抗凝超过1个月、国际化标准比值(INR)1.7～3.0[1]。排除标准：肝肾及甲状腺功能不全、营养不良或怀孕者、服用可能与华法林有相互作用药物(如胺碘酮、维生素K抑制剂等)的患者、有凝血功能障碍、华法林过敏者。

    1.2 试验方法

    1.2.1 标本采集及处理 在受试者知情同意的前提下，采集服药后空腹12 h外周静脉血3 m L(枸橼酸钠抗凝)，用于检测CYP2C9*3(1075A>C)和VKORC1(-1639 G>A)基因型，全血标本-20℃保存。同时采集患者的基本资料：年龄、性别、身高、体重、病因、伴随药物、使用华法林剂量及最近3次所测INR值等，计算BMI。INR值测定结果由山西医科大学第一医院检验科生化室提供。基因组DNA提取采用全血基因组DNA提取试剂盒(购自天根生化科技有限公司)，将提取好的基因组DNA-20℃保存。

    1.2.2 扩增阻滞突变体系-聚合酶链式反应技术(ARMS-PCR)法扩增 本研究所采用的ARMS-PCR引物和探针序列由北京鑫诺美迪基因检测技术有限公司提供 ......