李 镭，梁智星，梁法禹

    缺血预处理(ischemic preconditioning，IP)已经在动物试验中得到验证[1]，但临床实践中很难充分应用。异氟烷作为常用的全身麻醉药已经在临床上得到普遍应用。本文就异氟烷预处理后心肌功能的变化进行探讨。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂、仪器和动物 异氟烷(isoflurane)：山东科源制药有限公司(山东省医药工业研究所制药厂)；肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒：长春汇力生物技术有限公司生产；K-H缓冲液(Krebs-Henseleit buffer solution，KHB)、心脏保存液为HTK液：北京荣生医药科技发展中心；SD大鼠由山西医科大学实验动物中心提供。

    1.2 方法

    1.2.1 离体大鼠心脏模型的建立 成年SD大鼠36只，雌雄各半，体重270 g～320 g(6周龄～8周龄)，腹腔注射肝素(3 mg/kg)和戊巴比妥钠(65 mg/kg)，仰卧位，开胸，于升主动脉和头臂干近端切断主动脉和上腔静脉，切断下腔静脉，肺动脉分叉前切断肺动脉，取出心脏，迅速放入0℃～4℃K-H缓冲液中，冲洗出心脏内残留血液，并移至Langendorff灌注装置上，经主动脉灌注K-H液，根据大鼠正常生理血压范围，设定灌注压为80 mm Hg～100 mm Hg，灌注液温度维持35℃～37℃，鼠心周围温度在34℃～36℃。整个灌注期间用95%O2和5%CO2混合气体饱和K-H液。肺动脉根部切开，充分引流冠状静脉回流液。经预实验掌握切取技术后，正式实验时开胸取心至灌注开始控制在1 min内完成。稳定3 min～5 min后切开心耳，经左心房、二尖瓣，将连接测压导管的球囊送入左心室，测压导管的另一端连接多导生理记录仪。向心室球囊内缓慢注射适量生理盐水(55μL～70μL)，使左室舒张末压维持在10 mmHg～12 mm-Hg。平衡20 min后，心脏搏动达到稳定状态，测定血流动力学基础值并留取冠脉流出液标本。

    1.2.2 灌注及低温保存方法(HTK保存液) 连续灌注K-H液平衡30 min后，经主动脉根部单次灌注4℃的HTK液，灌注剂量为30 m L/kg，灌注时间为2 min，心脏表面同时降温，心脏停搏后置于HTK液中保存。在4℃条件下分组保存4 h、6 h和8 h，保存期间不进行重复灌注。保存结束后重新将鼠心移至Langendorff装置上灌注K-H液，逐渐复温至37℃，使心脏复跳，并持续灌注30 min，测定血流动力学指标并留取冠脉流出液测量心肌酶 ......