何玉萍，江 湧，何玉珊，许翌嘉

    动脉硬化(AS)是动脉血管壁的一种慢性炎症性疾病[1]，细胞黏附分子(CAMs)是介导细胞与细胞之间、细胞与细胞基质之间相互黏附的糖蛋白，正常情况下呈低水平表达，在炎性反应刺激下表达明显上调。研究表明，AS处内皮细胞分泌的黏附分子增加，炎性基因的表达也增加[2]。本实验采用单核细胞-内皮细胞(MC-EC)联合培养的方法，观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(ECV304)CAMs表达的影响，探讨ox-LDL损伤血管内皮细胞(VEC)的作用及机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料 ECV304细胞株(中山大学细胞库)，人类单核细胞系U937(上海细胞生物研究所)；RPMI-1640培养液(美国GIBCO)；胎牛血清(美国 GIBCO)；低密度脂蛋白(LDL，美国SIGMA)；单克隆抗体CD106-FITC、CD54-PE、CD62E-PE、CD62P-PE、IgG-PE、IgG-FITC(均是美国PharMingen产品)；流式细胞仪：(美国BECKMAN COULTE公司 ALTRA型)，四色荧光，配套EXPO 32采集分析软件。

    1.2 ox-LDL的制备 将LDL置于含10μmol/L CuSO4的PBS(pH7.2)溶液中，37℃温育24h，再将ox-LDL液置含200 μmol/L EDTA的PBS 4℃中透析24h，超滤除菌后4℃保存备用。

    1.3 实验方法

    1.3.1 MTT法检测不同浓度ox-LDL对细胞活性的影响细胞以5×104个/mL细胞数接种入96孔培养板，待细胞生长至稳定状态(约24h) ......