王海涛，杨明峰，孙保亮，曹晓岚

    随着社会人口老龄化及生活方式的改变，糖尿病的患病率呈逐年上升趋势，严重威胁人类健康。临床上反复发作的缺血性脑卒中患者10%～30%合并有糖尿病；缺血性脑卒中死亡病人中，糖尿病是非糖尿病病人的2倍或以上。因此糖尿病与脑缺血的关系日益受到人们的重视。糖尿病合并脑梗死时脑损伤机制亟需满意的动物模型来模拟实际的发病情况，目前，国外用于糖尿病研究的动物模型多为遗传型[1]，如ob/ob小鼠、db/db小鼠及肥胖型Zucker大鼠、OLETF大鼠等，其来源在我国相当困难且十分昂贵，不利于研究的开展。国内有采用链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)诱发慢性实验性糖尿病大鼠，在此基础上制作大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型[2-5]，但因所选糖尿病模型和脑缺血模型的不同，结果不尽一致。本实验在鼠糖尿病模型的基础上，应用线栓法制备大鼠MCAO模型，成功制备了糖尿病并脑梗死大鼠模型，现将实验操作方法及所得经验教训总结报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物分组 健康5周龄雄性Spraque-Dawley(SD)大鼠40只，随机分为假手术对照组(Sham组)、单纯脑梗死组(MCAO组)、单纯糖尿病组(DM组)、糖尿病脑梗死组(DM+MCAO组)，每组10只。假手术对照组及单纯脑梗死组给予普通饲料喂养，单纯糖尿病组和糖尿病脑梗死组给予高脂高糖饲料喂养，实验过程不合格及死亡大鼠在后续试验中予以补齐。1.1.2 主要试剂与材料 普通饲料和高脂高糖饲料(普通饲料中添加10%猪油、10%蛋黄粉和20%蔗糖)。饲料由泰山医学院实验动物中心提供，喂养前1周临时配制，压制成形后喂养。STZ由美国Sigma公司生产；2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)：北京索莱宝公司产品。

    1.2 方法

    1.2.1 糖尿病动物模型的制备 参照文献[6]制作糖尿病大鼠模型，高脂高糖饲料喂养至4周后，所有动物称重并测量血糖，继之用腹腔注射STZ的方法建立糖尿病模型。STZ浓度为30mg/kg，注射前将STZ溶于pH为4.5的0.1mmol/L的柠檬酸缓冲液中。假手术对照组和单纯脑梗死组注射同等容积的柠檬酸缓冲液 ......