赵 佩，牛争平，刘平平，雷小峰，杨清和

    偏头痛是一种常见的慢性神经血管性头痛，患病率约为15%[1]。世界卫生组织将严重偏头痛定性为最致残的慢性疾病之一，其发作类同于痴呆、四肢瘫痪和严重精神病[2]。本研究观察养血清脑颗粒对硝酸甘油致偏头痛大鼠硬脑膜肥大细胞脱颗粒的影响，探讨偏头痛的发病机制及养血清脑颗粒防治偏头痛的作用环节。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与试剂 健康雄性清洁级Wistar大鼠108只，体重250 g～300 g，均由山西医科大学实验动物中心提供，安静屏障环境喂养。硝酸甘油注射液：造模药物，由北京益民药业有限公司生产(批准文号：国药准字 H11020289，产品批号：20120601)。养血清脑颗粒天津天士力制药股份有限公司生产(批准文号：国药准字Z10960082，产品批号：120208)，每袋4 g，用蒸馏水配制成高剂量养血清脑颗粒溶液(0.32 g/m L)及低剂量养血清脑颗粒溶液(0.16 g/mL)备用。

    1.2 实验方法

    1.2.1 造模与分组 将108只健康雄性Wistar大鼠分为正常对照组、模型对照组、治疗高剂量组、治疗低剂量组、预防高剂量组及预防低剂量组，各组再随机分为30 min、60 min、180 min组，分别于造模后相应时间点处死大鼠切取标本。根据Tassorelli[3]皮下注射硝酸甘油建立大鼠偏头痛模型。正常对照组予皮下注射生理盐水，大鼠出现短时间的、次数不多的挠头、爬笼动作，未见耳红。治疗高、低剂量组大鼠在造模后10 min分别灌胃高、低剂量养血清脑颗粒1次，预防高、低剂量组大鼠在造模前分别灌胃高、低剂量养血清脑颗粒7 d。

    1.2.2 标本制备 正常对照组、模型对照组、治疗高剂量组、治疗低剂量组、预防高剂量组及预防低剂量组的30 min、60 min、180 min亚组于造模后灌注固定。于挠头明显侧剪取2块硬脑膜组织，将其投入4%多聚甲醛(p H 7.4，4℃)过夜固定，第二天行石蜡包埋切片，每张4μm，连续切片5张。根据赵汝香等[4]所述的Brandon改良甲苯胺蓝染色法对肥大细胞进行特染。计数肥大细胞(MCs)总数和脱颗粒数目(胞膜出现明显破裂或有颗粒外逸为脱颗粒)。计算肥大细胞脱颗粒阳性率。

    1.3 统计学处理 计量资料以均数±标准差(x±s)表示，运用SPSS17.0统计软件分析。各组间先行正态性检验及方差齐性检验。在各组总体方差相等的情况下，采用单因素的方差分析，各组间比较用LSD-t比较。分析给药顺序、剂量、时间的交互效应采用析因设计方差分析 ......