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编号:12646197
细胞外酸性环境对大鼠冠状动脉环静息张力的影响及其与钾通道阻断剂的关系(2)
http://www.100md.com 2014年9月1日 中西医结合心脑血管病杂志 2014年第9期
     1.5 实验方法

    1.5.1 冠状动脉环活性的检测 浴槽内盛有5 mL正常PSS溶液,持续通以100%氧气,液温维持在37 ℃。静息60 min后,用KCl(60 mmol/L)收缩冠状动脉环,静息期间每隔15 min用37 ℃正常的PSS溶液冲洗1次。血管环张力通过DMT换能系统采集,通过Chart7在计算机上记录。当KCl收缩冠状动脉环的幅度大于1 mN,并且相邻两次KCl收缩冠状动脉环的幅度不超过10%时,认为冠状动脉环的活性良好,可以开始正式实验。

    1.5.2 细胞外环境pH值梯度降低对大鼠冠状动脉环张力的影响 在静息状态下,将浴槽内pH7.4的正常PSS液更换为pH7.2的PSS液,待反应达坪台后,将浴槽内的液体依次更换为pH值为7.0、6.8、6.6的PSS液,观察细胞外偏酸性环境对大鼠冠状动脉环张力的影响。以pH值为6.6的最大收缩幅度为100%,计算不同pH值下大鼠冠状动脉环收缩的百分率。

    1.5.3 不同浓度KV、KATP、KCa通道阻断剂对细胞外环境pH值梯度降低时大鼠冠状动脉环张力的影响 在静息状态

    下,向浴槽内分别加入不同浓度KV、KATP、KCa通道阻断剂:KV通道阻断剂4-AP(0.3 mmol/L、1 mmol/L)、KATP通道阻断剂Gli(0.003 mmol/L、0.01 mmol/L、0.03 mmol/L)、KCa通道阻断剂TEA(1 mmol/L、3 mmol/L) ......
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