孟 佳,黄希艳,李 倩,朱陵群

    片仔癀对局灶性脑梗死大鼠BDNF 和IL6蛋白表达的影响

    孟 佳1,2,黄希艳2,李 倩2,朱陵群2

    目的观察片仔癀对局灶性脑梗死大鼠模型脑源性神经营养因子(BDNF)和白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达的影响。方法采用改良的Longa法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,SD大鼠随机分为7组:假手术组、模型组、脑得生组、尼莫地平组及片仔癀大、中、小剂量组。通过免疫组化方法检测脑组织BDNF和IL-6的蛋白表达,HE染色观察脑组织的病理损伤情况。结果在梗死中心区,模型组的BDNF和IL-6蛋白表达显著低于假手术组(P1 材料与方法

    1.1 实验动物与药物 SPF级SD雄性大鼠,体重260 g±20 g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,许可证编号:SCXK(京)2006-0009。片仔癀胶囊(漳州片仔癀药业股份有限公司提供,批号: 0711050);脑得生购自广东国医堂制药股份有限公司(批号:110101);尼莫地平片购自拜耳医药保健有限公司(批号:113275);兔抗大鼠BDNF和IL-6抗体购自武汉博士德生物有限公司和北京博奥森生物技术有限公司(批号:BA0565、bs-0782R);尼龙栓线购自北京沙东生物技术有限公司(型号2636),线身直径0.26 mm,栓头直径0.36 mm±0.02 mm,线身长40 mm。

    1.2 MCAO模型制备 按照已报道的改良Longa方法[3,4]制备模型:SD大鼠随机分为手术组和非手术组(假手术组),术前禁食12 h,腹腔注射3.5%水合氯醛麻醉(1 mL/100 g),颈正中切开皮肤,钝性分离肌群后暴露右侧颈总动脉、颈内动脉及颈外动脉,结扎颈外动脉及颈总动脉的近心端,在颈总动脉远心端剪一小口,将尼龙线栓从此小口插入颈内动脉,感觉阻力时立即停止进线,插入18 mm～22 mm,固定栓线和缝合皮肤。假手术组只行颈部正中切开和缝合。大鼠清醒后参照Longa方法对其神经功能进行评分[3,4]。

    1.3 动物分组及给药方法 给药剂量按大鼠与人的体表面积等效剂量折算,手术组根据术后Longa评分将纳入大鼠随机分为模型组,片仔癀大、中、小剂量组(486 mg/kg、162 mg/kg、54 mg/kg),脑得生组(486 mg/kg),尼莫地平组(10.8 mg/kg)。造模前3 d开始给药,造模后第7天取材。假手术组和模型组分别灌胃给予等体积的生理盐水,各组均每日给药1次,药物现用现配。

    1.4 取材及样品制备 神经功能评分后,各组大鼠3.5%水合氯醛腹腔注射麻醉,迅速断头取脑,冰上视交叉后2 mm处取大鼠脑组织置于10%的甲醛溶液中固定24 h,常规梯度酒精脱水、浸蜡包埋,冠状连续切片 ......