张 奇,林成仁,李 涛

    柴胡对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠炎症的干预作用

    张 奇,林成仁,李 涛

    目的探讨柴胡对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠干预作用,为临床应用柴胡治疗多发性硬化(MS)提供依据。方法C57雌性小鼠40只,随机分为空白对照组、EAE模型组、泼尼松组[7.8 mg/(kg·d)]和柴胡组[1.95 g/(kg·d)],每组10只。EAE模型组、泼尼松组和柴胡组6周龄时用MOG35-55多肽免疫建立EAE模型,造模后第3天灌胃给予蒸馏水或药物至实验结束。自造模当天观察各组小鼠体重、行为学;造模后第16天(发病高峰期)取脊髓组织行HE染色,观察炎性细胞浸润情况;采取尾静脉血,检测与多发性硬化主要相关炎症因子白细胞介素(IL)17E、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-21、IL-10、IL-23、IL-12(p70)、IL-17A、IL-17F和肿瘤坏死因子(TNF) α水平。结果与空白对照组比较,EAE模型组小鼠发病高峰外周血中IL-17E、IFN-γ、IL-17F水平升高(P1 材料与方法

    1.1 动物 SPF级雌性C57BL/6小鼠4周龄,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,合格证号SCXK(京)2012-0001。

    1.2 药物 柴胡颗粒(中国中医科学院西苑医院颗粒药房提供),泼尼松片(天津力生制药股份有限公司生产,批号1303040)。

    1.3 试剂MOG35-55(MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK,上海吉尔生化公司合成,纯度98.4%,批号:P130819-XZ051716),百日咳毒素(PT,Catalog Number:P7208,Sigma),灭活结核杆菌H 37RA(100 mg,Lot Number:2072054,Difco),完全弗氏佐剂(F5881-10ml,Lot Number:SLBB1387,Sigma),蛋白液相芯片试剂盒(美国EMD Millipore公司Cat.# MTH17MAG-47K),Mouse Th17 Magnetic bead panel(美国EMD Millipore公司Cat.#MTH17MAG-47K)。

    1.4 仪器 Luminex液相芯片检测技术平台(美国EMD Millipore公司),ICE-CL31R低温离心机(美国Thermo公司)。

    1.5 动物饲养环境 饲养于中国中医科学院西苑医院实验动物中心动物房。动物饲养条件:温度20℃～ 25℃,标准12h光照/12h黑暗节律,标准饲料和饮水 ......