林海青，杨金龙，姚晓东，李 晓

    糖尿病心脏自主神经病变(diabete cardiac neuropathy，DCAN)在糖尿病患者中发生率可达60%以上[1，2]。在自主神经损伤过程中，可出现迷走神经功能下降而交感神经功能相对增强[3-5]，造成自主神经功能异常，使房颤、室性心律失常和无痛性心肌梗死的发生率增加，加重糖尿病病情。神经营养因子在神经的生长发育、分化、营养、再生中发挥重要作用。本实验观察有关神经营养因子在糖尿病心脏中的变化及桂枝汤对炎症反应的影响，探索桂枝汤是否对其有调节作用，为运用中医药治疗DCAN提供线索和依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级Wistar大鼠55只，雄性，8周龄，体重280 g～300 g，由济宁鲁抗实验动物中心提供(许可证号：SCXK鲁20080002)。

    1.2 试剂与材料 链脲佐菌素(STZ，美国Sigma-Aldrich公司产品，批号：329A039)；甲钴胺片[弥可保，卫材(中国)药业有限公司，批号：120307A]；酪氨酸羟化酶(TH)、乙酰胆碱酶转移酶(CHAT)Elisa检测试剂盒(R＆D公司分装产品，批号：20121117)；神经生长因子(NGF)Elisa检测试剂盒(Abcam公司分装产品，批号：ab100757)；神经生长相关蛋白(GAP-43)Elisa检测试剂盒(R＆D公司分装产品，批号：20121117)；睫状生长因子(CNTF)Elisa检测试剂盒(PeproTech，批号：0711065)；白介素1β(IL-1β)Elisa检测试剂盒(Abcam公司，批号：GR127340-1)；白介素6(IL-6)Elisa检测试剂盒(Abcam公司，批号：GR112814-1)；肿瘤坏死因子(TNF-α)Elisa 检 测 试 剂 盒 (Abcam 公 司，批 号：GR126667-2)。桂枝汤：按照桂枝汤原方比例煎煮浓缩，加入辅料(辅料选用赤鲜糖醇和甜菊素比例99∶1)制成桂枝汤颗粒，1 g颗粒剂相当于2 g生药。使用时候配制水溶液，浓度为每毫升1 g生药。弥可保配制成浓度为0.03 mg/mL的悬浊液。

    1.3 方法

    1.3.1 制作糖尿病模型 大鼠55只，随机取10只作为空白对照组，其余大鼠给予链脲佐菌素腹腔注射(60 mg/kg)，空白对照组大鼠给予等量枸橼酸钠缓冲液。每日测定空腹血糖，以胰岛素皮下注射或者补充STZ方法，使血糖稳定(>16.7 mmol/L)。4周后，取成模大鼠39只，随机分为模型对照组、弥可保组、桂枝汤组 ......