局灶性脑缺血大鼠脑组织CD20的表达
神经细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
夏光明,倪小红,王洲羿,黄虎翔,肖展翅,刘秋梅,李 钢CD20作为跨膜的蛋白质是一种新型钙通道,CD20的激活是调节内源性钙离子变化的又一个影响因素,并通过钙离子变化直接调节钙离子通道活性。本研究采用大鼠局灶性脑缺血模型,用免疫组化和计算机图像分析技术检测局灶性脑缺血CD20的表达情况,初步探讨CD20在局灶性缺血脑组织中的变化。
1 材料与方法
1.1 动物及实验分组 雄性健康SD大鼠28只,体重200 g~250 g,由武汉大学实验动物中心提供。饲养室内温度25℃,自由进食。实验室温度25℃,实验前12 h禁食禁水。大鼠随机分为假手术组及大脑中动脉阻塞(MCAO)后3 h组、6 h组、24 h组。实验分批进行,每批含各组大鼠7只。
1.2 试剂与仪器 免疫组化试剂盒购自武汉谷歌生物技术有限公司。
1.3 动物模型的制作 大鼠用10%水合氯醛(35 mg/kg)腹腔注射麻醉。仰卧位固定,颈正中线左侧旁开约0.5 cm切口,沿胸锁乳突肌内缘分离肌肉和筋膜,分离左侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA),结扎颈外动脉远心端,用微动脉夹暂时夹闭CCA主干以及ICA入颅部。然后在ECA残端剪0.3 mm小口,将线拴插入,轻推尼龙线尾端经CCA分叉部沿ICA入颅 ......
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