gAd对3T3-L1脂肪细胞肉碱酯酰转移酶-1表达的影响
脂联素,结构域,2结果,3讨论
孟海艳,廉 如,陈显久,王 彦gAd对3T3-L1脂肪细胞肉碱酯酰转移酶-1表达的影响
孟海艳1,廉 如2,陈显久3,王 彦1
目的 探讨脂联素球状结构域(gAd)对3T3-L1脂肪细胞肉碱酯酰转移酶-1的影响。方法 用gAd蛋白干预分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,干预结束后用RT-PCR法检测各组细胞脂肪酸分解途径关键酶肉碱酯酰转移酶-I转录水平的变化,用Western blot法检测各组细胞肉碱酯酰转移酶-1翻译水平的变化。结果 与对照组相比,各实验组肉碱酯酰转移酶-1在转录和翻译水平的表达均显著增高(P1 材料与方法
1.1 实验材料 脂联素gAd,本课题组前期已成功制备[6];3T3-L1前脂肪细胞株,山西医科大学第一医院内分泌科实验室冻存;DMEM/F12(1∶1)、高糖DMEM,GIBCO公司(美国);胎牛血清(FBS),杭州四季青生物有限公司;胰酶、二甲基亚砜(DMSO)、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、牛血清白蛋白(BSA)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX),Sigma公司(美国);考马斯亮蓝试剂盒,南京建成生物公司;Trizol试剂,Invitrogen公司(美国);PCR引物,上海生物工程公司;cDNA反转录试剂盒(RevertAidTM First Strand cDNA Synthesis Kit),Fermentas公司(美国);PCR试剂盒(FastStart Universal SYBRGreen Mster) ......
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