尚茹茹，刘晓红，张 锦，袁 锋，温 婷

    致动脉粥样硬化过程中不同表型的巨噬细胞对泡沫细胞形成的影响及机制

    尚茹茹1，刘晓红2，张 锦2，袁 锋3，温 婷3

    目的 探讨致动脉粥样硬化过程中不同表型的巨噬细胞对泡沫细胞形成的影响及机制。方法 提取C57BL/6小鼠骨髓单核细胞诱导分化为巨噬细胞，分别给予干扰素γ(IFN-γ)、内毒素(LPS)、白细胞介素4(IL-4)刺激分化为M1和M2型巨噬细胞，加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育48 h。高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内的总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)的含量。行RT-PCR及Westernblot检测巨噬细胞清道夫受体CD36及SR-A1在mRNA和蛋白水平的表达；行Westernblot检测内质网应激(ERS)的标志性分子糖调节蛋白78 ( GRP78)和GRP94的表达。结果 M1型巨噬细胞组油红O染色阳性细胞较M2型巨噬细胞组少，M1型巨噬细胞内TC、FC及CE的含量较M2型巨噬细胞低(P1 材料与方法

    1.1 实验材料 C57BL/6小鼠购自山西医科大学动物中心；巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、IL-4、LPS、IFN-γ；ox-LDL(北京协生生物有限公司)；RT-PCR试剂盒(FERMENTA公司)；cDNA合成试剂盒和Real Master Mix(SYBR Green )试剂盒(Takara，日本)；辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(北京中杉金桥公司)；兔抗CD36、SR-A1、GRP78和GRP94多克隆抗体(Santa Cruz公司)。

    1.2细胞培养及分组 据文献方法[6]，将分化的巨噬细胞按1×108个/L的密度种入6孔板内，分成3组：空白对照组、IFN-γ+LPS处理组、IL-4处理组。IFN-γ+LPS处理组加入20 ng/mL IFN-γ和LPS100 ng/L分化成M1型巨噬细胞 ......