七叶皂苷钠对脑缺血再灌注损伤大鼠炎性细胞因子的影响
匀浆,2结果,3讨论
张雪梅,骞秀芳七叶皂苷钠对脑缺血再灌注损伤大鼠炎性细胞因子的影响
张雪梅1,骞秀芳2
目的 观察七叶皂苷钠对脑缺血再灌注(CI/R)损伤大鼠脑组织中炎性细胞因子的影响,探讨其作用机制。方法 采用四血管阻塞10 min的方法建立CI/R大鼠模型,并进行12 h再灌注,试验分为假手术组、模型组及七叶皂苷钠高、中、低剂量组(10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg),术前3 d开始腹腔注射给药,每天1次,术后1 h给药1次。再灌注12 h后,ELISA法检测脑匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平。结果 七叶皂苷钠高、中剂量可显著降低CI/R损伤大鼠的神经行为学评分,与模型组比较差异有统计学意义(P1 材料与方法
1.1 动物 清洁级SD大鼠,雌雄各半,体重240 g~280 g,由河北医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(冀)2008-1-003。动物分笼饲养,适应性喂养1周后进行试验。
1.2 药品和试剂 注射用七叶皂苷钠,购自北京四环科宝制药有限公司。大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司。其余试剂均为分析纯。
1.3 主要仪器 光学显微镜,日本奥林巴斯公司产品;电子匀浆机,宁波新芝生物科技股份有限公司产品;高速冷冻离心机,中国科大创新股份有限公司产品;紫外分光光度计,日本岛津公司。
1.4 CI/R损伤大鼠模型的制备 采用四血管阻塞法建立全脑缺血再灌注动物模型[5]。取SD大鼠,戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后,颈中切口,分离第一颈椎双侧的横突孔,电凝双侧椎动脉并分别用无创动脉夹夹闭双侧颈总动脉,10 min后恢复血流灌注,常规缝合颈部切口,再灌注12 h。造模成功标准:夹闭颈总动脉后30 s~60 s内动物昏迷,睫毛反射消失,瞳孔放大,眼球变白,松开动脉夹后20 s~30 s,眼球恢复红色,意识恢复,并可以活动。剔除术后出现意外的大鼠 ......
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