管媛媛，张宏如，张皓然，顾一煌

    麦粒灸对自发性高血压大鼠血压及mTOR蛋白表达的影响

    管媛媛，张宏如，张皓然，顾一煌

    目的 观察麦粒灸对自发性高血压大鼠血压及雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的影响，以对其降压机制作初步探讨。方法 将12周龄的自发性高血压大鼠随机分为模型组、麦粒灸组，另取12周龄SD大鼠设为正常组。干预前测量每只大鼠血压，并记录。各组相同环境饲养。模型组、正常组不施灸，麦粒灸组每天同一时间段取“足三里”“曲池”进行麦粒灸治疗，每穴灸5壮，每日1次，共28 d。末次施灸结束，再测各组大鼠血压变化并记录。取各组大鼠心脏，用Westernblot检测心肌组织mTOR表达水平。结果 12周时，模型组和麦粒灸组血压明显高于正常组(P0.05)。16周时，麦粒灸组血压明显降低，与模型组比较差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组 12周龄雄性自发性高血压大鼠20只，同周龄雄性SD大鼠10只。由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证编号：SCXK(京)2012-0001，合格证编号：11400700098261。所有SHR大鼠随机分为模型组和麦粒灸组各10只。同周龄雄性SD大鼠设为正常组。

    1.2 干预方法 各组相同环境饲养。模型组、正常组不施灸，麦粒灸组于每天同一时间段进行艾灸治疗，将40∶1的金艾绒制作成麦粒大小的灸炷，用特制的大鼠固定板固定好大鼠，取大鼠 “曲池”“足三里” 剪毛后进行艾灸，取穴方法参照《实验针灸学》[2]，每穴灸5壮，每日1次，共28 d。

    1.3 血压的测定 通过智能无创血压计(NIBP，澳大利亚)；分别于12 周龄和16周龄，在大鼠清醒安静状态下，将大鼠固定于特制的铁丝套中，套上加热器，温度达 37 ℃～40 ℃，加热10 min～15 min，暴露鼠尾动脉于仪器外，连接血压计的套管套于尾动脉末端，无创性测定尾动脉血压。每只测5次，取平均值。本实验以收缩压(systolic bloodpressure，SBP)为观察指标。

    1.4 心肌组织mTOR蛋白表达的测定 实验结束后，处死大鼠，分离心脏，迅速置于液氮，后转入-80 ℃待测。大鼠心肌组织总蛋白浓度采用 Bradford法测定。小鼠心肌组织中mTOR蛋白用常规的Westernblot 印迹法测定。 取 70 μg总蛋白加样于预灌制的8%～15%聚丙烯酰胺凝胶中，在100 V条件下进行电泳2 h，然后电转移至聚偏氟乙烯 (PVDF)膜。用5%脱脂奶粉室温封闭2 h后，将膜采用AntimTOR蛋白-一抗(美国Abcam公司)孵育过夜 ......