王 艳

    电针百会透曲鬓穴对急性脑出血大鼠蛋白酶激活受体-1表达的影响

    王 艳

    目的 探讨电针百会透曲鬓穴对急性脑出血大鼠模型的神经功能缺损及血脑屏障(BBB)通透性的影响及其机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为3组：假手术组、模型组、电针组，每组根据6 h、1 d、3 d、7 d不同时间点分为4个亚组。尾状核内注射Ⅶ型胶原酶制作脑出血模型。脑出血术后各时间点进行神经功能缺损评分；通过测量脑组织伊文思蓝(EB)含量来测量BBB通透性；免疫组化和荧光实时定量PCR方法检测蛋白酶激活受体-1(PAR-1)表达变化。结果 电针治疗可显著改善模大鼠在脑出血后6 h、1 d、3 d、7 d各时间点神经功能缺损评分和脑组织EB含量，电针治疗组与模型组比较差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠108只，体重250 g～300 g。采用完全随机的方法分为3组：假手术组、模型组、电针组。除假手术组外，每组依据不同时间点分为4个亚组，即6 h、1 d、3 d、7 d组，每个亚组取12只大鼠。

    1.2 脑出血模型的制备 参照Rosenberg方法[8]，将大鼠用10%水合氯醛(400 mg/kg)腹腔注射麻醉，俯卧位固定于立体定位仪上，头顶剪毛，常规消毒，正中切口，骨膜剥离器剥离骨膜，暴露前囟及冠状缝，以前囱为坐标原点，向右旁开2.9 mm，向后0.2 mm确定注射点坐标，用牙科钻在颅骨表面钻直径为0.8 mm的圆孔，穿透颅骨但不伤及脑组织，用固定在立体定向仪上的5 μL微量注射器(针头直径0.7 mm)沿钻孔进针垂直插入脑组织6 mm，到达尾状核位置，10 min缓慢匀速注入含0.6 U/μL Ⅶ型胶原酶的生理盐水(normal saline，NS)3 μL，留针10 min，然后缓慢出针，用骨蜡封闭颅骨上的钻孔，缝合切口。 假手术组：不注射胶原酶，其余操作同模型组。

    1.3 电针治疗方法 参照华兴帮等制定的《实验动物穴位图谱》，定位“百会”和“曲鬓”穴。将大鼠固定于实验架上，在百会穴位处常规消毒，选用30号2.5 cm不锈钢毫针，快速刺入皮下并斜向右下方达曲鬓穴，针刺方法参照《常用动物动物腧穴图谱》标准。将一块生理盐水湿润的纱布绑在大鼠尾巴根部，另一根毫针插在此纱布中。将G6805-2型电针治疗仪正极接百会穴毫针，负极接大鼠尾巴毫针，连续波，频率2 Hz，强度0.2 mA，留针30 min。电针治疗组于造模后6 h开始治疗，每天进行电针治疗1次 ......