microRNA在肥胖大鼠脂肪组织中的差异表达
网膜,高脂,2结果,3讨论
支翠菊,黄 瑛,祁炜罡,张代富microRNA在肥胖大鼠脂肪组织中的差异表达
支翠菊,黄 瑛,祁炜罡,张代富
目的 建立高脂饮食诱导的大鼠肥胖模型,初步探讨肥胖大鼠脂肪细胞、体质量、体长、血糖、血脂的变化,为进一步研究microRNA在肥胖诱发脂类代谢紊乱的相关分子机制奠定基础。方法 将40只雄性SD大鼠随机分为普通饮食组和高脂饮食组,分别以基础饲料和高脂饲料喂养,尾静脉采血检测造模前及4周、8周的血糖、血脂水平,8周时眼眶放血处死大鼠;用动物电子秤称量大鼠体重;留取大鼠网膜脂肪组织,用皿式电子分析天平称重,并将其保存在-80 ℃液氮中备用,油红染色光学显微镜观察脂肪组织形态,采用微距阵基因芯片技术筛选肥胖大鼠模型的网膜脂肪组织差异表达的microRNA,Real-Time PCR验证结果。结果 建模8周末,高脂饮食组大鼠体重、网膜组织重量、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白均高于普通饮食组(P1 材料与方法
1.1 实验动物 40只健康雄性断乳SD大鼠,6周~7周龄,体重220 g±25 g,斯莱克公司提供,许可证号:SCXK(沪)2012-0002。按体重随机分为对照组(普通饲料喂养)和模型组(高脂饲料喂养),SPF清洁级百级中分笼喂养,每笼3只~8只,饲料、饮水、垫料、笼具均经消毒灭菌后使用,严格执行清洁级实验动物操作规程,12 h明暗循环,动物自由进食水。
1.2 饲料配方 采用合成饲料喂养大鼠,其中所含营养素和能量能保证大鼠生长发育的基本要求,在此基础上调整脂肪和淀粉含量,配出高脂饲料。普通饲料由斯莱克公司提供,热量比:蛋白质28%,脂肪12%,碳水化合物60%;高脂饲料由斯莱克公司提供:100 g高脂饲料包括基础饲料55 g,猪油30 g,奶粉10 g,蛋黄粉5 g。热量比:蛋白质20%,脂肪60%,碳水化合物20%。
1.3 方法
1.3.1 大鼠肥胖模型的建立 将40只雄性断乳SD大鼠分为普通饮食组和高脂饮食组,分别以基础饲料和高脂饲料喂养8周。每周称重、测量体长1次,并观察精神状态、引水量、尿量、食欲、大便、毛发光亮度、皮毛、活动、眼睛等。空腹尾静脉采血检测造模前及4周、8周的血糖、血脂水平。造模评定标准:大鼠体重超过标准体重的20%即达到肥胖标准 ......
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