吴 海，张浩天

    非糖尿病与糖尿病主动脉夹层病人发生自主神经病变的对比研究

    吴 海1，张浩天2

    目的 分析非糖尿病与糖尿病主动脉夹层(AD)病人发生自主神经病变(AN)的几率，探讨自主神经活性改变及糖尿病自主神经病变(DAN)在AD发病的作用。方法 随访我院2013年1月—2015年12月收治主动脉夹层病人，分析AN发生率。抽取正常人、AD病人及糖尿病AD病人主动脉标本，进行酪氨酸羟化酶(TH)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫组织化学染色。结果 糖尿病AD病人出现多汗或少汗几率高于非糖尿病AD病人(P=0.05)。AD病人主动脉壁中TH和ChAT表达明显升高(P1 资料与方法

    1.1 研究对象

    1.1.1 标本获取 选取2013年1月—2015年12月因主动脉夹层在我院接受治疗的病人。AD病人387例，A型主动脉夹层( type A aortic dissection，TAAD)病人156例，B型主动脉夹层(type B aortic dissection，TBAD)病人231例。所有病人均经64排CT血管造影(computed tomography angiography，CTA)、增强CT或核磁共振(Magnetic Resonance Imaging，MRI)证实为主动脉夹层，接受手术治疗病人经手术探查或主动脉造影确诊。排除重复住院、医源性主动脉夹层病人。主动脉标本包括正常主动脉、夹层主动脉、合并糖尿病夹层主动脉。正常主动脉标本取自心脏移植供体的升主动脉，另外两组取自主动脉夹层病人术中夹层撕裂明显处。

    1.1.2 主要试剂 RIPA细胞裂解液，碧云天生物技术研究所；PMSF蛋白提取液，科瑞生物；Cocktail蛋白酶抑制剂，瑞士罗氏公司；磷酸化蛋白酶抑制剂，瑞士罗氏公司；基质金属蛋白酶2(MMP2)兔抗人抗体，美国CST 公司；基质金属蛋白酶9(MMP9)兔抗人抗体，美国CST公司；酪氨酸羟化酶(TH)兔抗人抗体，武汉博士德生物有限公司；胆碱乙酰转移酶(ChAT)兔抗人抗体，武汉博士德生物有限公司；GAPDH 兔抗人抗体，美国CST公司；BCA法蛋白定量试剂盒，碧云天生物技术研究所；羊抗兔多克隆荧光二抗，美国LI-COR公司；蛋白marker，德国Thermo公司。

    1.1.3 主要设备 病理切片机，德国Leica公司；组织摊片烤片机，武汉俊杰公司；载玻片及盖玻片，江苏世泰公司；抗原修复用微波炉，美的公司；酶联免疫检测仪，美国Perkin Elmer公司；超低温冰箱，德国Eppendof公司；恒温水浴箱 ......