侯祥平，陈柳丹，林玉洁，陈克芳，麦华超，陈 珂，李建军

    自噬在血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞迁移和增殖的作用

    侯祥平，陈柳丹，林玉洁，陈克芳，麦华超，陈 珂，李建军

    目的 探讨自噬对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移和增殖的影响。方法 采用体外培养大鼠胸主动脉VSMCs，采用不同浓度AngⅡ(10-10mol/L～10-6mol/L)刺激VSMCs 24 h，免疫印迹检测细胞自噬标志物LC3、Beclin1的表达；采用最佳浓度AngⅡ(10-7mol/L)对VSMCs刺激不同时间点(0 h、0.5 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h)，同时检测LC3、Beclin1表达。采用AngⅡ1型受体阻断剂(洛沙坦钾)、AngⅡ型受体阻断剂(PD123319)进行预孵，之后采用最佳浓度AngⅡ刺激，检测LC3表达。采用自噬特异性阻断剂3-MA进行预孵，通过损伤愈合试验，CCK8增殖试验检测细胞自噬在AngⅡ诱导的VSMCs迁移和增殖的作用。结果 AngⅡ刺激可引起VSMCs发生自噬，表现为LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1上调，且呈现明显时间、剂量效应(P0.05)。自噬特异性阻断剂3-MA能抑制AngⅡ诱导VSMCs的迁移和增殖。结论 AngⅡ可通过AT1R诱导VSMCs发生自噬，从而促进VSMCs迁移和增殖。

    血管紧张素Ⅱ；自噬；血管平滑肌细胞；迁移；增殖

    动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是临床常见疾病，是缺血性心脑血管疾病的主要病理基础，其发病机制尚未完全清楚，临床无特异性药物治疗[1]。血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)增殖与迁移的异常是引起AS的重要因素[2]。血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为肾素-血管紧张素系统(RAS)的主要效应分子可诱导多种炎症因子，促进VSMCs增殖和迁移[3-4]，参与AS的发生和发展过程。选择性血管紧张素-1型受体(AT1)拮抗剂通过阻断AngⅡ与AT1受体结合产生的一系列生物学活性物质，从而抑制AS形成和发展[3]。近年来，自噬在心血管疾病方面研究取得进展。目前研究更多关注自噬与心肌肥厚、心室重构、心肌缺血/再灌注损伤的关系，而在自噬调控血管组成细胞的增殖、分化和转归研究甚少[5-6]。

    本研究探讨自噬在AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞迁移和增殖的作用，为探究AngⅡ治疗相关血管疾病提供新策略。

    1 材料与方法

    1.1 实验试剂 鼠抗人α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)单克隆抗体(福建迈新生物技术公司) ......