胡玉英，黄 河，宋正良，刘 辉，司冰洁，莫海珍

    补肾止颤方联合埋针对帕金森病大鼠TH、GFAP表达的影响

    胡玉英1，黄 河1，宋正良2，刘 辉3，司冰洁3，莫海珍3

    目的 观察补肾止颤方联合埋针对帕金森病(PD)大鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶(TH)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的影响，探讨补肾止颤方联合埋针对PD大鼠神经元细胞的保护作用。方法 采用蛋白酶抑制因子(PSI)皮下注射法制作慢性PD大鼠模型，免疫组织化学方法及蛋白印迹法检测各组大鼠中脑黑质区TH、GFAP表达的变化。结果 经补肾止颤方联合埋针治疗后的PD大鼠TH蛋白表达明显增加，TH阳性细胞明显增多，GFAP表达明显降低，GFAP阳性细胞明显减少，与模型组相比较有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 一般材料

    1.1.1 动物 成年雄性SPF级SD大白鼠32只，体重250 g±20 g，由广西医科大学实验中心提供。

    1.1.2 药物及针具 ①补肾止颤方，组方：鹿角胶10 g，阿胶10 g，生龟板20 g，党参15 g，枸杞子30 g，白芍30 g，生地25 g，火麻仁15 g，麦冬15 g，炙甘草6 g，生鳖甲15 g，肉苁蓉30 g，天麻15 g，黄精10 g，山萸肉10 g，钩藤30 g。为单味免煎颗粒，由江苏省江阴市江阴天江药业有限公司制备，生产批号：1206003；参照《现代医学实验动物学》计算给药量，药物配制成含生药2.574 g/mL，灌胃液体量为每次1 mL/100 g大鼠，其浓度及等效剂量按体表面积折算。②多巴丝肼片由上海罗氏制药公司提供(批准文号：国药准字 SH10930198，批号：SH2099)，每片250 mg；③埋针针具：选取图钉型无菌揿针针具(苏州市华伦医疗用品有限公司生产的顺和牌无菌揿针，批号：11101)。

    1.1.3 主要试剂 PSI购自Calbiochem公司；TH和GFAP免疫组化抗体购自北京博奥森生物技术有限公司； TH多克隆抗体(美国Chemicon公司)，GFAP多克隆抗体(anit-GFAP，美国BioVision)，β-actin(美国Sigma公司)；其他试剂均为市售、分析纯化。

    1.1.4 主要设备 组织包埋机和自动组织脱水机(广州市华俊医疗器械有限公司)，组织切片机(LEICA RM2235)，生物组织烤片机(湖北省孝感市亚光医学电子技术有限公司)，三用电热恒温水温箱(上海跃进医疗器械厂)，光学显微镜(OLYMPUS BX60)。

    1.2 方法 ......