王智华，田首元，王建刚，贺 萱，朱 健

    自噬及PI3K-Akt通路在舒芬太尼后处理心肌缺血再灌注损伤保护中的作用

    王智华1，田首元2，王建刚2，贺 萱1，朱 健2

    目的 探讨自噬及PI3K-Akt通路在舒芬太尼后处理心肌缺血再灌注损伤保护中的作用。方法 选用雄性SD大鼠(220 g～260 g)35只，随机分为5组：假手术组(S组)、心肌缺血再灌注损伤组(I/R组)、舒芬太尼后处理组(SP组)、舒芬太尼后处理+PI3K-Akt通路的抑制剂Wortmannin组(SP+W组)、Wortmannin组(W组)。I/R组、SP组、SP+W组以及W组采用结扎冠脉左前降支(LAD)30 min、再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型。S组在冠脉左前降支(LAD)下穿线但不结扎。于再灌注前5 min，I/R组由股静脉给予生理盐水1 mL，SP组给予舒芬太尼(1 μg/kg)，SP+W组给予舒芬太尼(1 μg/kg)及Wortmannin(15 μg/kg)，W组给予Wortmannin(15 μg/kg)。再灌注120 min时腹主动脉取血，检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)的浓度；处死大鼠后，取心尖组织，Western blot法检测Akt、磷酸化的Akt(p-Akt)、LC3-Ⅱ的表达；电镜下观察自噬体的生成情况。结果 与S组比较，I/R组、SP组、SP+W组及W组CK-MB含量、LC3-Ⅱ表达增加，p-Akt/Akt升高，差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组 雄性SD大鼠35只(SPF级)，220 g～260 g，购于中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心。35只SD大鼠采用随机数字表法随机分为5组：假手术组(S组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)、舒芬太尼(宜昌人福药业有限责任公司，批号1150316)后处理组(SP组)、舒芬太尼后处理+PI3K-Akt通路的抑制剂渥曼青霉素(Wortmannin，山西普兴生化工程有限公司，批号20150503)组(SP+W组)、Wortmannin组(W组)。

    1.2 方法

    1.2.1 实验模型制备 实验前大鼠禁食8 h以上，自由饮水，20%乌拉坦(5 mg/kg)腹腔注射麻醉。大鼠麻醉后，将大鼠腹部朝上，四肢固定，在其皮下插入电极，连接心电图机，观察记录正常Ⅱ导联心电图。然后颈部正中作气管切开，插入导管后固定，连接动物呼吸机人工通气(设置潮气量3 mL/100 g，频率70次/min)。于左胸壁心脏搏动最明显处开胸 ......