刘云峰，丁亚琴，钟向琴，任乐乐，白 涛，，刘萌萌，章 毅

    京尼平苷调控大鼠胰岛素分泌的机制研究

    刘云峰1，丁亚琴2，钟向琴2，任乐乐2，白 涛1，2，刘萌萌2，章 毅2

    目的 探讨京尼平苷在大鼠胰岛素分泌中的作用及其机制，为糖尿病的治疗提供依据。方法 将胶原酶P经胆总管注入雄性Wistar大鼠的胰腺，消化11 min，histopaque 1077 梯度离心得到分离纯化的胰岛。用放射免疫分析法检测胰岛素分泌功能，采用ELISA方法检测环鳞酸腺苷(cAMP)含量，通过膜片钳技术记录电压依赖性钾通道(Kv)电流和Ca2+电流。结果 在8.3 mmol/L的葡萄糖下，京尼平苷可促进胰岛素分泌，给予exendin(9-39)、SQ22536和H89，可明显减弱京尼平苷的胰岛素分泌量以及环磷酸腺苷的含量，且在电压依赖性钾电流中也有相同的抑制作用。此外，京尼平苷调控胰岛素分泌作用还受到钙电流的影响。结论 京尼平苷通过、cAMP信号通路及其下游受体PKA来发挥调控胰岛素分泌的作用。

    京尼平苷；胰岛素分泌；胰高血糖素样肽-1；环磷酸腺苷；电压依赖性钾通道

    糖尿病在我国已成为一个日益严重的公共卫生问题，其中绝大部分(95%)是2型糖尿病，发病原因包括胰岛素分泌的缺陷和胰岛素敏感性的增加。胰岛素分泌缺陷有很多种，包括胰岛素的不应答[1]、葡萄糖刺激后胰岛素早期阶段的分泌缺失[2]、血浆中基础胰岛素及刺激后胰岛素浓度的降低[3]以及进行性降低的胰岛素分泌能力[4]等。因此，调节胰腺β细胞的胰岛素分泌能力对预防和治疗2型糖尿病非常重要。

    近年来，越来越多的数据表明胰高血糖素样肽-1(GLP-1)可通过其受体来调节胰岛素分泌和葡萄糖代谢，然而，GLP-1的半衰期非常短，在循环系统中迅速被二肽基肽酶-4(DPP Ⅳ)降解，存在时长不超过2 min[5]，因此研究能够激动GLP-1的小分子类化合物具有重要价值。其中京尼平苷(GP)作为GLP-1受体(GLP-1R)的激动剂备受关注，有报道称京尼平苷具有抗糖尿病作用[6]，并且通过激活GLP-1R促进了胰岛细胞瘤细胞(INS-1)系的胰岛素分泌[7-8]。本研究旨在阐明京尼平苷在急性分离大鼠胰岛组织及原代胰岛β细胞中的作用及其潜在机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 雄性Wistar大鼠，由北京中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，体重220 g～260 g。饲养环境：温度23 ℃±3 ℃，湿度(50±5)% ......