麝香保心丸对心肌梗死小鼠微循环障碍的作用研究
中性,白细胞,2结果,3讨论
施珊岚,张艳达,贺治青,丁 茹,吴宗贵,梁 春·基础医学论著/研究·
麝香保心丸对心肌梗死小鼠微循环障碍的作用研究
施珊岚,张艳达,贺治青,丁 茹,吴宗贵,梁 春
目的 观察麝香保心丸改善心肌梗死小鼠外周微循环障碍的作用及机制。方法 选取30只雄性C57小鼠,10只为正常对照组,其余20只心肌梗死造模后1周,予腹腔注射脂多糖30 min后,随机分为空白对照组及麝香保心丸干预组,各10只。观察各组间小鼠提睾肌微循环差异(流速及白细胞黏附);流式分析中性粒细胞黏附分子CD11b的表达。结果 与空白对照组比较,麝香保心丸干预组可显著改善微循环障碍,并能降低白细胞黏附至微循环内皮表面,差异有统计学意义(P1 材料与方法
1.1 试剂 麝香保心丸由上海和黄药业生产(每粒22.5 mg);LPS及罗丹明6G均购自Sigma公司(美国)。PE-标记大鼠来源的小鼠CD11b抗体购自BD Pharmingen(美国)。异氟烷麻醉剂购自深圳瑞沃德公司。
1.2 实验动物及分组 雄性C57小鼠体重18 g~22 g,由中国科学院上海药物研究所实验动物中心提供。实验前动物禁食12 h,自由饮水。选取30只雄性C57小鼠,10只为正常对照组,其余20只开胸心肌梗死造模后1周,予腹腔注射LPS(2 mg/kg)30 min后,随机分为空白对照组(MI+LPS组)及麝香保心丸干预组(MI+LPS+TCM组),各10只。空白对照组予生理盐水;麝香保心丸干预组予24 mg/mL的麝香保心丸溶液。复方中药经研磨、生理盐水超声助溶2 h及2 000 r/min离心15 min处理,取其上清液备用,为减少潜在的溶液污染现用现配。所有干预都经舌下给药以模拟临床实际干预方式,体积为10 μL。干预后观察记录60 min。
1.3 小鼠心肌梗死造模 根据参考文献[15]进行无呼吸机支持下小鼠心肌梗死模型制备。使用异氟烷诱导麻醉小鼠,仰面固定后给予连续纯氧负载异氟烷持续麻醉,保持气体流量在0.5 mL/min,酒精消毒胸前区手术区域后,沿肋骨方向剪开皮肤及皮下组织暴露肋间隙,蚊式钳撕开肋间肌肉并顺势撑开肋间隙,暴露并挤出小鼠心脏至体外,直视下快速结扎心脏冠脉前降支,可见心前区运动消失并膨出,小心止血并回纳至胸腔,荷包缝合胸部皮肤封闭手术破口,结束手术,脱离麻醉机复苏小鼠直至其苏醒。
1.4 提睾肌微循环观察 小鼠心肌梗死后1周,使用1%戊巴比妥腹腔麻醉,LPS腹腔注射(2 mg/kg)30 min后,将小鼠固定于特制处理板 ......
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