李奇恒，苏继源，丁 茹，贺治青，梁 春，吴宗贵

    ·基础医学论著/研究·

    痰瘀同治方药对高脂血症小鼠脂质代谢的调节作用及机制研究

    李奇恒，苏继源，丁 茹，贺治青，梁 春，吴宗贵

    目的 观察复方中药对高脂血症模型小鼠脂质代谢的调控作用及机制。方法 选取60只雄性C57小鼠，随机分为3组：高脂饮食组、高脂+复方中药组、高脂+他汀组，单纯高脂饮食喂养制备模型。模型制备成功后连续灌药12周后，观察各组间小鼠血浆胆固醇、胆汁酸及相关基因表达的变化。结果 与高脂饮食组小鼠相比，复方中药治疗组小鼠血浆总胆固醇水平显著降低(P0.05)，同时伴有末端回肠顶端钠依赖性胆汁酸转运体(ASBT)基因表达水平显著下降(P1 材料与方法

    1.1 一般材料

    1.1.1 动物与试剂 SPF级雄性C57小鼠60只，8周龄，20 g左右。复方中药胶囊：由上海长征医院制剂室提供，每粒含药粉0.35 g；阿托伐他汀钙片(立普妥，辉瑞公司)；特殊高脂饲料(常州开源动物饲料有限公司，D12109C，致高血脂小鼠特殊饲料)；L-苯丙氨酸购自Sigma公司；石胆酸、熊脱氧胆酸、脱氧胆酸标准品均购自Sigma公司。

    1.1.2 分组、造模及给药 60只小鼠随机分为3组：高脂饮食组、高脂+复方中药组以及高脂+他汀组。适应喂养2周后采用给予特殊高脂诱导高血脂，高脂喂养两月经隐静脉采血测定血浆总胆固醇(TC)，剔除血脂正常小鼠。药物干预组小鼠经口灌胃给药，连续12周，每日一次。各组给药剂量分别为：阿托伐他汀10 mg/(kg·d)和复方中药0.27 kg/(kg·d)，高脂饮食组用等体积生理盐水灌胃。末次给药24 h后处死小鼠，留取血浆、粪便、末端回肠、肝脏等组织。

    1.2 血浆胆固醇的测定 实验终点颈动脉采集全血，离心分离血浆，采用酶法检测盒检测不同组小鼠TC水平。

    1.3 UPLC-MS/MS测定胆汁酸

    1.3.1 UPLC-MS/MS条件 色谱条件：流动相：0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)；洗脱梯度：0～4 min 5%～70%B；4～8 min 70%B；8～9 min 70%～98%B；9～10 min 98%B流速 0.4 mL/min；进样量 3 μL；柱温 25℃；质谱条件为：气帘气 30℃；碰撞气 8℃；电喷雾电压 4 500 V；温度55℃；离子源辅助气1为55 ℃；离子源辅助气2为55 ℃。

    1.3.2 样品处理 取粪便样本10 mg，加入1 mL含内标100 ng/mL的甲醇溶液超声溶解10 min ......