郝 莉，徐玉英，田新红，游言文，奚肇庆

    银杏内酯B对阿尔茨海默病大鼠海马c-fos、Caspase-3和Caspase-8的影响

    郝 莉1，2，徐玉英2，田新红2，游言文2，奚肇庆1

    目的 探讨银杏内酯B(GB)对阿尔茨海默病(AD)大鼠c-fos、Caspase-3和Caspase-8的影响。方法 将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和银杏内酯B组，采用 Morris水迷宫检测学习记忆，免疫组织化学分析海马c-fos阳性神经元光密度值，荧光定量PCR和Western blot检测海马Caspase-3 和Caspase-8的mRNA和蛋白水平。结果 5 mg/kg的银杏内酯B可缩短AD大鼠逃避潜伏期，增加穿越平台次数，提高海马c-fos的表达，下调凋亡相关基因 Caspase-3和Caspase-8 mRNA和蛋白表达。结论 银杏内酯B可改善AD大鼠学习记忆能力，这种改善可能与上调AD大鼠海马组织c-fos表达，下调Caspase-3和Caspase-8 mRNA和蛋白水平有关。

    阿尔茨海默病；银杏内酯B；学习记忆；c-fos；Caspase-3；Caspase-8

    学习记忆障碍是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)的主要临床表现，Aβ沉积形成老年斑、神经纤维缠结、神经元与突触的丢失是AD的主要病理学改变。Aβ引起的神经元与突触丢失是AD学习记忆障碍的主要原因[1-2]。c-fos存在于海马组织[3-5]，与认知记忆和神经元凋亡相关。凋亡是神经元与突触丢失的主要方式，Caspase-3、Caspase-8是凋亡关键因子。已有研究表明：中药银杏叶提取物可改善AD相关学习记忆力下降，而银杏内酯B是银杏叶提取物的主要活性成分，具有保护神经元、促进学习和改善记忆的作用[6]。实验证实银杏内酯B(Ginkgolide B，GB)可改善AD相关的学习记忆缺陷[7]，然而其具体作用机制尚未阐明。所以本研究建立AD大鼠模型并采用银杏内酯B治疗，从行为学、组织学与分子生物学等方面探讨银杏内酯B保护海马神经元、改善AD相关学习记忆力及c-fos、Caspase-3、Caspase-8的作用，为中药单体防治AD提供理论和实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 动物与试剂仪器 雄性清洁级 Sprague-Dawley(SD)大鼠，体重180 g～220 g，由河南实验动物中心提供[合格证号：SCXK(豫)2010-0002]。银杏内酯B购自中国食品药品检定研究院；Aβ1-42购自Sigma公司；鼠单克隆一抗c-fos购自Abcam公司；兔多克隆一抗Caspase-8购自Santa Cruz公司；兔多克隆一抗Caspase-3购自Cell Signaling公司；辣根过氧化物酶标记羊抗鼠二抗购自北京中杉金桥公司；莱卡显微成像系统购自莱尔公司；全自动凝胶成像系统购自天能公司；Morris水迷宫为中国医学科学院研制 ......