别自东，王 东，何 琳，陈秀华，王玉凤，林晓静，王竟靖，沙 勇

    微小RNA-125b作用于SFRP5调节急性心肌梗死后心室重构的实验研究

    别自东1，2，王 东3，何 琳4，陈秀华1，王玉凤1，林晓静1，王竟靖4，沙 勇4

    目的 探讨微小RNA-125b(miR-125b)对小鼠急性心肌梗死后心室重构的影响及机制。方法 利用左前降支结扎法构建小鼠心肌梗死模型，以心电图及病理改变作为建模成功的观察指标。将急性心肌梗死组小鼠随机分3组：假手术组(6只)、急性心肌梗死组(12只)及急性心肌梗死+miR-125b抑制剂转染组(12只)。模型建立2周后，取各组小鼠制备病理切片，石蜡切片HE染色、石蜡切片免疫组化染色及石蜡切片胶原染色(Masson法染色)检测相关指标。结果 HE染色显示：假手术组可见心肌横纹清晰，排列整齐，细胞核明显，细胞无明显肿胀；而急性心肌梗死组则观察到多发散在的坏死灶，界限清晰，可见有明显的成纤维细胞增生，心肌肥大，同时可见较多的纤维化；急性心肌梗死+miR-125b抑制剂转染组，急性心肌梗死的典型生理现象较未加入miR-125b抑制剂转染组有明显改善。免疫组化染色显示：分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)在假手术组小鼠组织中高表达；急性心肌梗死组，SFRP5表达显著下调；而在急性心肌梗死+miR-125b抑制剂转染组，SFRP5表达明显提高。Masson染色显示：假手术组心肌组织被染成均匀红色，可见前壁的厚度较一致，心肌组织胶原纤维少，无条索状及融合的胶原纤维；急性心肌梗死组小鼠左心室前壁心肌梗死区心肌组织被胶原纤维取代，且显著增多，呈条索状，分割包绕心肌束，部分胶原纤维融合，并可见前壁变薄；急性心肌梗死+miR-125b抑制剂转染组，急性心肌梗死后典型生理现象改善，计算胶原容积积分比较，差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级，雄性，体质量相近的C57/BL6小鼠，体质量25 g±3 g，购自山东大学动物实验中心。

    1.2 主要试剂和设备 miR-125b抑制物(广州锐博生物科技有限公司)；石蜡(美国Sigma-Aldrich公司)；苏木素(北京索莱宝科技有限公司)；免疫组化试剂盒(广州锐博生物科技有限公司)；Masson染液(南京建成生物工程研究所)；慢病毒(广州赛哲生物科技有限公司)；小动物呼吸机(北京中西远大科技有限公司)；眼科及常规手术器材(乐仁堂医疗器械公司)；AZ100多功能连续变焦显微镜(日本Nikon公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 动物分组 按照随机数字表法分为假手术组(6只)、急性心肌梗死组(12只)及急性心肌梗死+miR-125b抑制剂转染组(12只) ......