武鸿儒，李 兴，高晓芳，韩雪鸿，刘 晶

    球形脂联素对糖尿病心肌病大鼠心脏保护作用的研究

    武鸿儒，李 兴，高晓芳，韩雪鸿，刘 晶

    目的 观察球形脂联素(gAd)对糖尿病心肌病(DCM)的影响，并探讨其可能作用机制。方法 30只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠选取10只作为正常对照组(A组)，余20只建造糖尿病心肌病模型，造模成功后大鼠随机分为阳性对照组(B组)、球形脂联素治疗组(C组)。C组大鼠每日给予球形脂联素治疗。治疗8周后，采用苏木素伊红(HE)染色法观察大鼠心肌组织大体形态，免疫组化法检测大鼠心肌组织中Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad7含量，原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡。结果 HE染色示：B组大鼠心肌细胞排列紊乱；C组大鼠心肌细胞排列较B组整齐。免疫组化结果示：Ⅰ型胶原蛋白、TGF-β1、Smad3蛋白表达较A组、C组增多(P1 材料与方法

    1.1 实验药物及试剂 链脲佐菌素(STZ)购自美国sigma公司，gAd购自美国Peprotech公司，兔抗大鼠抗体购自武汉博士德生物工程有限公司，TUNEL细胞凋亡检测试剂盒购自江苏凯基生物技术股份有限公司。

    1.2 实验动物 清洁级雄性SD大鼠30只，体重180 g～200 g，由山西医科大学实验动物中心提供。高糖高脂饲料由北京科澳协力有限公司提供，普通饲料由山西医科大学实验动物中心提供。

    1.3 模型建立及分组 采用随机数字表法分为正常对照组(A组，n=10)与造模组(n=20)，分别给予普通饲料和高糖高脂料喂养。8周后，造模组给予空腹一次性腹腔内推注1%STZ 30 mg/kg；A组经腹腔内推注等量柠檬酸-柠檬酸钠钠缓冲液。72 h后，尾静脉测2次随机血糖≥16.7 mmol/L，且出现多饮、多食、多尿、精神萎靡等现象为造模成功[2]，期间死亡3只。继续喂养12周[3]后，造模组随机分为阳性对照组(B组，n=8)、gAd治疗组(C组，n=9)。C组给予10 μg/kg gAd每日腹腔注射，A组与B组每日腹腔注射同等剂量生理盐水。8周后，取大鼠进行后续实验。

    1.4 实验步骤 gAd干预8周后，空腹称重，胸腹备皮后，腹腔注射10%水合氯醛麻醉大鼠，暴露腹腔，腹主动脉取血后一部分立即检测糖化血红蛋白(HbA1c)，一部分离心后取上清-70 ℃冰箱保存。剖开胸腔，取出心脏，冲洗后称重，左心室同一部位取组织，放入保存液中，4 ℃过夜后制作石蜡切片。

    1.5 生化指标检测 全自动生化分析仪检测空腹血糖(FBG)和HbA1c ......