吴建坤，牛争平

    左乙拉西坦对硝酸甘油致偏头痛大鼠高颈髓谷氨酸能和GABA能中间神经元的影响

    吴建坤1，牛争平2

    目的 观察左乙拉西坦(LEV)对硝酸甘油所致偏头痛大鼠行为学及对高颈髓谷氨酸能和GABA能中间神经元的影响，探讨左乙拉西坦对偏头痛的防治作用以及可能的作用机制。方法 将24只健康雄性SD大鼠普通喂养1周，采用分层随机法，将其分成假模型组(6只)和模型组(18只)。制作实验性偏头痛大鼠模型，造模成功后再将模型组大鼠随机分为模型对照组(6只)、LEV低剂量干预组(6只)及LEV高剂量干预组(6只)。各组按照实验设计分别给予生理盐水及LEV不同剂量灌胃。造模成功后观察大鼠在行为学方面的改变。30 min作为一个观察时间单元，采取持续时间分段计数的方式观察90 min内各个时间段的大鼠挠头、爬笼和甩头的次数。复制偏头痛模型3 h后，给予腹腔注射麻醉，进行甲醛灌注，取颈髓1-2。用免疫组化方法对谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)染色，然后用光学显微镜观察谷氨酸和GABA免疫阳性细胞的表达情况，并在同侧脊髓后角部位随机选取5个高倍视野，依次记录阳性细胞数。结果 行为学变化：与假模型组对照，其余各组大鼠的挠头次数、爬笼次数和甩头次数在各个时间段内均呈现明显增加(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 24只雄性清洁级SD大鼠，体重250 g～300 g，由山西医科大学实验动物中心提供。维持室温22 ℃，相对湿度50%，压强梯度30 Pa，自然光照节律，普通饮食。

    1.2 药品和试剂 兔抗GABA抗体，由北京博奥森生物技术有限公司提供；兔多克隆抗体to L Glutamate(abcam9440)、SABC试剂盒、DAB显色剂，由博士德生物工程有限公司提供；硝酸甘油注射液(每支5 mg)由河南润弘制药股份有限公司生产(批准文号：国药准字H20057216，产品批号：1604202)；LEV(0.5 g/片)由UCB Pharma S.A.(比利时)生产(批准文号：H20110410，产品批号：137713)，按照成年人每天1000 mg为低剂量，2 000 mg为高剂量，根据人和大鼠的等效剂量换算，计算大鼠LEV用药量，用生理盐水配成LEV溶液(低剂量为100 mg/kg，高剂量为200 mg/kg)备用；4%多聚甲醛固定液，博士德生物工程有限公司，产品批号：11K17B68；10%水合氯醛溶液：100 mL生理盐水加入10 g水合氯醛(天津市科密欧化学试剂有限公司生产，批号：20151010)，现配现用 ......