潘艳芳，方 艳，应小平

    Exendin-4对淀粉样 β 蛋白所致大鼠学习记忆和海马神经元胞内钙离子的影响

    潘艳芳，方 艳，应小平

    目的 探讨Exendin-4对淀粉样 β 蛋白( Aβ1- 42)所致大鼠学习记忆及对大鼠海马神经元细胞内钙离子浓度的影响。方法 SD雄性大鼠( n= 40)分为对照组、Aβ1- 42、Exendin-4、Exendin-4 + Aβ1- 42等4组。双侧海马注射 Aβ1- 42 建立阿尔茨海默病(AD)模型，Exendin-4预处理后进行Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力， 利用激光扫描共聚焦显微成像技术检测海马神经元细胞内钙离子[Ca2+]i荧光强度。结果 与对照组相比， 海马单独注射 Aβ1- 42 可导致大鼠学习记忆能力明显下降( P0.05)；Exendin-4预处理逆转了Aβ1- 42引发的海马神经元细胞内Ca2+的浓度增高(P1 材料与方法

    1.1 动物与试剂 成年雄性 Sprague-Dawley (SD)大鼠230 g～250 g， 由西安交通大学实验动物中心提供。将40只大鼠随机分为4组，每组10只 ： control、 Aβ1-42 (3 nmoL)、Exendin-4(2 nmoL)和 Aβ1-42+ Exendin-4。Exendin-4 和Aβ1- 42均购置美国 Sigma 公司。Exendin-4 和Aβ1- 42经微量二甲基亚砜 ( DMSO) 充分溶解后， 用磷酸盐缓冲液( phosphate buffered saline， PBS) 稀释。Aβ1-42 在 37 ℃下孵育 72 h， 间断振荡，使其老化成寡聚体。各组大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉 (300 mg/kg) 麻醉后， 固定于脑立体定位仪(68004， 瑞沃德公司 )上。 切开头皮，暴露颅骨，参照大鼠脑立体定位图谱，以前囟点 为基准， 用骨钻于钻孔， 将自制的不锈钢给药导管插入大鼠双侧海马 CA1 区后3.0 mm、 中线旁开 2.2 mm、 深度 3.0 mm， 再利用微量注射泵 (KD Scientific， Inc， KDS 310 Plus， USA) 和 5 μL微量注射器将药物或溶剂 ( 2 μL)缓慢注入双侧海马，给药速度 0.2 μL/min。药物注射完后留针 5 min， 药物注射间隔 15 min。注射药物后，颅骨上的注射孔用骨蜡封口、 皮肤缝合并给予抗生素处理。恢复1周后开始水迷宫试验。

    1.2 Morris水迷宫测试 大鼠被放置在一个直径为 150 cm、 深度为 50 cm的水迷宫宫体中 ......