依达拉奉注射液对高胆红素血症脑损伤新生大鼠血清S100B蛋白水平的影响
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申雅洁1,阴怀清2,曹芳芳2,贾晓君2
目的依达拉奉注射液干预后对高胆红素血症脑损伤新生大鼠血清S100B蛋白浓度的影响。方法将96只7 d龄SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、高胆红素血症组(B组)、依达拉奉注射液干预组(C组),每组根据处死时间分为4个亚组。给予B组、C组大鼠腹腔注入1次胆红素,同样方法给予A组大鼠注入1次生理盐水,造模后C组大鼠立即腹腔注射依达拉奉注射液,最后在各时间点将各组大鼠血清及脑组织取出。采用HE染色法观察脑组织的病理学改变,Elisa法测定血清S100B蛋白浓度,计算相关数据并进行统计学分析。结果造模后,明显的神经行为异常均出现在B组和C组大鼠,各时间点C组大鼠较B组症状明显改善,A组大鼠行为无明显异常。造模24 h后,B组、C组大鼠脑组织出现水平不一的水肿、变性及炎性浸润等,随着时间延长程度加重。各时间点C组大鼠脑组织改变程度较B组减轻,A组大鼠脑组织结构基本正常。B组大鼠血清S100B蛋白浓度高于A组、C组,与时间呈正相关,差异有统计学意义(P1 材料与方法
1.1 实验动物分组 将96只7 d龄以Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组:正常对照组(A组)、高胆红素血症组(B组)、依达拉奉注射液干预组(C组)。每组根据处死时间不同分为4个亚组:24 h组、48 h组、72 h组、96 h组,每个亚组8只大鼠。
1.2 注射用胆红素溶液及依达拉奉注射液溶液配制 避光称取4 mg胆红素晶体,溶于1 mL 0.5 mol/L NaOH溶液中,再加入双蒸水9 mL,浓度为4 mg/mL,之后用0.5 mol/L HCl溶液将pH调至8.5,1 h内使用。取1支20 mL(30 mg)依达拉奉注射液溶液,使用生理盐水稀释至200 mL,浓度为0.15 mg/mL,避光保存。
1.3 造模及方法 采用腹腔注射方法给予B组、C组大鼠按100 μg/g剂量注入1次胆红素,采用同样方法给予A组大鼠按同样剂量注入1次生理盐水,造模后C组大鼠立即腹腔注射依达拉奉注射液,剂量为2 mg/(kg·d),持续4 d。
1.4 标本制备 在不同时间点以5%水合氯醛将大鼠麻醉,将麻醉后大鼠固定于手术板上,逐一打开大鼠胸腔及腹腔,将心脏、肝脏充分暴露,以5 mL注射器小心刺入心脏跳动最明显处,抽取血液0.5 mL于干燥EP管中,静置30 min后以3 000 r/min离心10 min ......
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