糖尿病合并缺血性脑梗死后脑组织RECK表达及其与MMP-9关系的实验研究
蛋白酶,神经元,2结果,3讨论
,糖尿病合并缺血性脑梗死后脑组织RECK表达及其与MMP-9关系的实验研究
上官士娜1,朱梅佳2
目的观察 RECK、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在糖尿病合并脑梗死(CI)后脑组织损伤中的作用。方法将110只Wister大鼠随机分成假手术组、单纯脑梗死组(CI组)和糖尿病合并脑梗死DM组+CI组。采用高糖高脂饮食及腹腔注射小剂量链脲霉素法制作糖尿病大鼠模型,线栓法实现大脑中动脉缺血再灌注模型,免疫组化法检测脑组织RECK、MMP-9表达。结果RECK和MMP-9主要表达于缺血半暗带神经元、神经胶质细胞等处;CI组、DM+CI组RECK较假手术组表达明显减少(P1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 110只体重170 g~220 g的健康雄性Wister大鼠(山东大学实验动物中心提供),随机分组后均喂养至270 g~340 g。假手术组25只和单纯脑梗死组(CI组)40只Wister大鼠以普通饲料喂养;糖尿病脑梗死组(DM+CI组)45只Wister大鼠以高脂高糖饲料喂养,并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)。CI组和DM+CI组制作大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,随机分成再灌注1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d亚组,每亚组5只~8只大鼠。
1.2 方法
1.2.1 糖尿病大鼠模型的建立 高糖高脂饲养DM+CI组大鼠2个月,然后空腹腹腔注射30 mg/kg 链脲佐菌素(Sigma公司)1次,注射后1个月和2个月检测体重、血糖水平[4]。体重270 g~340 g,随机血糖16.7 mmol/L~25.6 mmol/L者选为糖尿病大鼠。
1.2.2 局灶性脑缺血再灌注模型的建立 改良Longa线栓法[5]实现MCAO模型。室温下线拴插入CI组和DM+CI组大鼠右侧颈内动脉约23 mm,栓塞右侧大脑中动脉,假手术组线栓插入深度为17 mm~18 mm,固定线栓,1.5 h后拉出,手术时大鼠肛温保持在36.5 ℃~37.5 ℃。
1.2.3 神经功能评分 大鼠清醒后,参照Longa评分标准[6]进行神经功能评分。0分:无阳性体征;1分:不能完全伸展对侧前爪;2分:行走时向对侧转圈;3分:向对侧倾倒;4分:不能自发行走 ......
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