崔 琳，王幼平，谢世阳，李 彬，王新陆，于 瑞，郝轩轩，高 原，王小晓，朱明军

    ·基础医学论著/研究·

    血管紧张素Ⅱ对原代培养大鼠心肌成纤维细胞增殖及转分化的影响

    崔 琳1，王幼平1，谢世阳1，李 彬1，王新陆2，于 瑞2，郝轩轩2，高 原1，王小晓1，朱明军1

    目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)对原代培养的新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts，CFs)增殖及转分化的影响，摸索合适的AngⅡ浓度。方法应用胰蛋白酶消化出生1 d～3 d 乳鼠心脏，差速贴壁法分离培养心肌成纤维细胞，免疫荧光法鉴定心肌成纤维细胞波形蛋白(vimentin)表达；用不同浓度的AngⅡ作用于心肌成纤维细胞，MTT法检测AngⅡ对心肌成纤维细胞增殖影响；免疫荧光技术检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)荧光含量；Westernblot技术检测α-SMA蛋白表达量变化。结果不同浓度 AngⅡ作用于心肌成纤维细胞，10-6、10-7mol/L AngⅡ能促进成纤维细胞增殖增加；10-5、10-6、10-7mol/L AngⅡ能促进α-SMA荧光强度增加；10-6mol/L AngⅡ可引起α-SMA蛋白表达量增加，且差异具有统计学意义。结论AngⅡ可引起心肌成纤维细胞增殖；同时可诱导α-SMA表达量增加。

    血管紧张素Ⅱ；新生大鼠；心肌成纤维细胞；波形蛋白；α-平滑肌肌动蛋白；原代培养

    慢性心功能不全是各种心脏疾病导致心功能不全的一种综合征，是心血管疾病死亡的主要原因之一。导致其发生发展的基本机制是心室重构(ventricular remodeling，VR)[1-3]。心肌细胞肥大、心肌间质纤维化是心室重构的主要特征，其也是决定慢性心力衰竭(CHF)的发病率、死亡率非常重要的病理因素。因此，如何逆转心室重构成为国内外共同的研究热点。

    心肌成纤维细胞(CFs)是心脏中数量最多且主要合成、分泌心脏细胞外基质(ECM)的细胞类型[4-5]。胶原过度增生、沉积导致心肌纤维化可能是心室重构的主要病理基础。在心室重构过程中，肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)在其中起着极为重要的作用，血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为RAAS最为重要的效应分子，具有众多的生物学活性，与心室重构密切相关，可引起CFs的增生和心脏间质纤维化[6-10]。

    本实验通过体外原代提纯培养新生大鼠(1 d～3 d)的CFs，通过AngⅡ处理CFs，在细胞水平研究AngⅡ对CFs增殖及其向肌成纤维细胞(Myofibro blast ......