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    慢性心力衰竭病人外周Th17细胞功能检测的临床意义

    古丽仙·玉素甫

    目的探讨慢性心力衰竭病人外周血中CD4+IL-17+ Th17细胞及白介素-6(IL-6)、白介素-22(IL-23)、白介素-17(IL-17)、RORγt的表达变化及其与慢性心力衰竭病程进展的关系。方法选取2013年1月—2014年6月在我院心血管内科确诊的慢性心力衰竭病人60例，同期无心脏疾病的健康人30名为对照。分别抽取不同心功能分级的慢性心力衰竭病人及对照者外周血，以流式细胞术检测外周血中CD4+IL-17+ Th17细胞表达水平，real-time PCR检测外周血单核细胞(PBMC)中IL-6、IL-23、IL-17、RORγt基因表达变化。结果慢性心力衰竭病人CD4+IL-17+辅助性T细胞17(Th17)百分率、Th17细胞特异性转录因子RORγt和IL-6、IL-23、IL-17基因表达水平均明显高于健康对照组(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 2013年1月—2014年6月在我院心血管内科确诊的慢性心力衰竭病人60例，男42例，女28例；病程1年～8年；年龄48岁～76岁(62.82岁±8.60岁)；其中高血压性心脏病18例，冠心病20例，扩张型心肌病11例，瓣膜性心脏病11例。入选标准：参照中华医学会心血管病学分会2007年制定的《中国慢性心力衰竭诊断治疗指南》确诊为CHF至少3个月；纽约心脏病学会(NYHA)心功能Ⅰ级～Ⅳ级；左室射血分数(LVEF)0.05)，具有可比性。本研究方案经过医院伦理学委员会审查批准，所有受试对象均知情同意。病人确诊后详细观察心衰的症状、心率、心律、血压、呼吸等变化，记录心电图及24 h动态心电图。另选择同期在本院体检的心功能正常人30名为健康对照组，其中男16名，女14名，年龄(56.24±12.13岁)。

    1.2 主要试剂与仪器 RPMI 1640和胎牛血清(美国Thermo公司)；人淋巴细胞分离液 (天津市灏洋生物制品科技有限责任公司)；佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素(Ion)、莫能菌素(Mon)、破膜剂、CD4-FITC、IL-17A-APC流式抗体；Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit逆转录试剂盒以及Fast Start Universal SYBR Green Master荧光定量RT-PCR试剂盒，德国Roche公司；ABI7500实时荧光定量PCR仪，美国应用生物系统公司；BD FACSVerseTMSystem流式细胞仪 ......