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    心脉隆注射液对阿霉素所致心肌细胞损伤的保护机制研究

    袁李礼1，蒋宇2

    目的探讨心脉隆注射液对阿霉素所致心肌细胞损伤的保护作用和机制。方法建立阿霉素所致的H9C2心肌细胞损伤模型，并采用心脉隆注射液干预。采用CCK8法测定心肌细胞活性，检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量，检测Caspase-3活性，WesternBlot分析Caspase-3表达，免疫荧光分析细胞自噬相关蛋白LC3B。结果与对照组比较，阿霉素组细胞活性明显降低(P1 材料与方法

    1.1 实验材料 大鼠心肌细胞系H9C2细胞(中科院上海细胞库)，心脉隆注射液(云南腾药)、阿霉素(上海阿拉丁)，DMEM低糖培养基、胰酶、胎牛血清、青霉素链霉素(Gibco)，CCK8试剂(日本同仁)，超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒、丙二醛(MDA)测定试剂盒、Caspase-3活性检测试剂盒(江苏碧云天)，BCA蛋白定量试剂盒(WellBiology)，兔抗LC3B单克隆抗体(Sigma)，鼠抗Caspase-3单克隆抗体(Proteintech)，荧光二抗(Invitrogen)，β-actin抗体(博士德)。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养和分组H9C2细胞接种于DMEM低糖培养基(含10%胎牛血清)中，培养条件为5%CO2、37 ℃、待细胞生长至融合度80%～90%，以1∶3比例传代培养，将培养的细胞分为对照组、阿霉素组、阿霉素+心脉隆组；对照组采用常规培养，阿霉素组采用5μg/mL阿霉素处理，阿霉素+心脉隆注射液组采用5μg/mL阿霉素处理同时给予不同浓度心脉隆注射液。

    1.2.2CCK8法分析心肌细胞活性 以5×103个细胞/孔接种于96孔板，分组处理，对照组(常规培养)、阿霉素组(5μg/mL阿霉素)、阿霉素+不同浓度心脉隆注射液组(5μg/mL阿霉素+0.25mg/mL、0.50mg/mL、0.75mg/mL、1.00mg/mL心脉隆注射液) ......