神经干细胞侧脑室内移植对脑瘫鼠的治疗效果
阳性细胞,1材料与方法,2结果,3讨论
, ,脑性瘫痪(cerebral palsy,CP)简称脑瘫,是一种非进行性脑损伤所致的,以姿势异常和运动障碍为主要表现的综合征,多在小儿出生前至出生后1个月内发生,常合并有感知觉障碍、智力障碍等症状[1]。CP不仅对患儿的生长发育及日后生活带来巨大影响,而且给患儿家庭带来沉重的负担。目前临床上尚无确切治疗脑瘫的方法,也无有效药物,只能依靠综合治疗方法进行早期康复治疗[2]。干细胞移植技术及基因临床治疗技术日新月异的发展,为CP患儿的治疗康复提供了新途径[3]。为了探讨干细胞移植是否对CP的治疗有效,本研究采用改良的HIE手术方法对Wistar大鼠进行脑瘫建模,建模后行侧脑室内神经干细胞(NSCs)移植治疗,并对模型组、对照组及实验组大鼠神经行为学检测结果、Morris水迷宫逃避潜伏时间以及脑室旁白质中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的含量进行对比分析,以探究侧脑室内NSCs移植对脑瘫鼠模型的治疗效果。
1 材料与方法
1.1 实验动物 选取60只7日龄健康、SPF级Wistar大鼠,体重13 g~15 g,均喂养于自由进食、进水,相对湿度45%~60%,室温23℃~25℃,光照12 h的环境中;大鼠购买自新疆医科大学实验动物中心,许可证编号:SYXK(新)2015-0004。
1.2 药品与仪器 侧脑室神经干细胞由本实验室自行配置[4];兔抗神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)由汉博士德生物工程有限公司提供;生物显微镜BX50F4,由日本OLYPUS公司提供。
1.3 动物分组与建模 建模方法:除对照组外,对48只大鼠行改良HIE造模方法。所有大鼠麻醉后,固定在手术板上,颈前正中作切口,分离并结扎左颈总动脉,然后缝合切口;将大鼠置于37℃的水封闭缺氧箱中,氧气含量为8%,维持2 h;对建模后的大鼠,参考Hideyuki[5]的方法进行神经行为学及病理学检查,选取24只建模成功大鼠。 对照组假手术后,给予等量生理盐水。 模型组造模后回笼饲养,给予等量生理盐水。 NSCs组(实验组)建模3 d后给予NSCs移植。
1.4 治疗方法 实验组大鼠建模3 d后,麻醉并进行颅骨钻孔。将大鼠置于立体定向仪头架上,进行左侧脑室穿刺,微量泵缓慢注入2 μLNSCs移植液 ......
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