党参对压力负荷致心衰小鼠电生理重构的影响
缓冲液,左室,1材料与方法,2结果,3讨论
,, , , ,心力衰竭(HF)是各种结构改变或功能减退的心脏疾病导致心室充盈及(或)射血能力受损而引起的一组复杂的临床综合征[1]。据统计,发达国家1%~2%的成年人患有HF,70岁以上的人群中HF发病率可高达10%[2]。大约有50%的HF病人在诊断后5年内死亡[3],其中有50%的死亡原因是心源性猝死[4]。电生理重构导致的恶性心律失常是HF病人死亡的重要原因之一[5]。电生理重构是指在HF时,由于心肌细胞病理生理机制发生变化,而改变其电冲动的产生及传导[6]。目前,临床上仍缺少针对HF电生理重构的有效药物。中医认为,气虚血瘀水停是HF的基本病机,而气虚贯穿HF发展始终[7],党参是临床防治HF常用的益气药。本实验通过使用党参干预压力负荷导致HF小鼠,观察党参对HF小鼠电生理重构的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠25 g±5 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证编号:SCXK(京)2012- 0001,饲养于中国中医科学院中药研究所动物房,每天定时喂食、喂水并清洁动物房。
1.2 实验药物及配制溶液 中药党参颗粒制剂,购自北京中医药大学东方医院;酒石酸美托洛尔(倍他乐克):阿斯利康制药有限公司,生产批号:1209047;水合氯酸为国产分析纯试剂;咖啡因;丁卡因;配制溶液:台氏液,KB液,消化液,0Ca/0Na台式液,30%丙烯酰胺溶液,4×分离胶缓冲液(1.5M Tris- HCl,pH 8.8,200 mL),4×积层胶缓冲液(0.5M Tris- HCl,pH6.8,50 mL),10%过硫酸铵,10×电泳缓冲液,染色液,脱色液,丽春红染液,10×PBS,转膜缓冲液,5%封闭液。
1.3 实验仪器 单细胞动缘探测系统(IonOptix,USA),电子刺激器 SEN 27103 (IonOptix,USA),小动物超声心动检测系统(Vevo770 ultrasound system,Visual Sonics Inc,USA),心电检测平台ecgTUNNEL(EMKA Technologies,France),Langendorff心脏灌流系统,微电极B15014F(微探科学仪器有限公司)等。
1.4 缩窄小鼠胸主动脉动物造模 对麻醉后的小鼠于胸骨正中线处剪开皮肤,切口(0.5~1) cm,钝性剥离肌肉。暴露主动脉弓胸主动脉分支处,将28- gauge注射器针头平行放置于胸主动脉上,用4号聚丙烯缝线将针头和主动脉结扎 ......
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