急性心肌梗死与稳定型心绞痛病人高密度脂蛋白胆固醇对内皮功能的影响
孵育,磷酸化,内皮细胞,1资料与方法,2结果,3讨论
,高密度脂蛋白胆固醇(high- density lipoprotein,HDL- C)因其可逆转胆固醇、保护内皮细胞、抗氧化、抗炎、抗凝、促进受损的内皮细胞愈合等作用而具有潜在的抗冠状动脉粥样硬化作用[1- 2]。但是,多中心临床试验研究结果显示提高HDL- C水平并没有起到所预期的抗冠状动脉粥样硬化作用[3- 4]。HDL- C水平并不能作为预防冠状动脉粥样硬化的唯一参考指标。冠状动脉痉挛与内皮功能障碍密切相关,而且冠状动脉痉挛与冠状动脉狭窄和急性心肌梗死所致的严重心血管事件呈正相关[5- 6]。本研究以急性心肌梗死(acute myocardiai infarction,AMI)和稳定型心绞痛(stable angina,SA)病人为研究对象,对比两者体内HDL- C对内皮功能影响的差异,以进一步明确HDL- C功能在抗动脉粥样硬化中的重要性。
1 资料与方法
1.1 研究对象 AMI组和SA组病人各25例,为2015年6月—2015年12月就诊于延安大学附属医院心内科病人。AMI组年龄30岁~52岁(38.52岁±8.46岁);SA组年龄32岁~55岁(40.64岁±9.26岁)。排除糖尿病、高血压、严重感染性疾病、肾衰等疾病。对照组(C组)为来延安大学附属医院体检的28名健康志愿者,年龄35岁~ 50岁( 41.42岁±7.57岁。所有研究对象均签署知情同意书,本研究已通过延安大学附属医院伦理委员会批准。
1.2 血浆HDL- C提取 按文献描述[7],采用梯度离心法提取HDL- C:入院时即刻抽取病人空腹静脉血离心离心(4℃,4 000 r/min,10 min)后将加入1∶500 的EDTA(Sigma- Aldrich,134 mmol/L)和1∶10 000 的BHT(Sigma- Aldrich,200 mmol/L)的血浆移入预冷的超高速管(38 mL,Beckman coulter公司)混匀后依次进行3次离心(4℃,50 000 r/min,21 h)。第一次离心后血浆由上至下分为:乳糜颗粒(CM,乳白色)、水、低密度脂蛋白(LDL,浅橘黄色)、高密度脂蛋白(亮绿色)、杂质(深橘黄色)。第二次离心后血浆由上至下分为:LDL(浅橘黄色)、1.063密度液、HDL(亮绿色)、杂质(深橘黄色)。第三次离心后血浆由上至下分为:HDL(亮绿色)、1.21密度液、杂质(深橘黄色)。每次离心后均将HDL抽取用0.22 μm的滤器(MerkMillipore公司)过滤,过滤后的HDL用BCA蛋白浓度测定试剂盒(Thermo Scientific 公司)测定HDL蛋白浓度后放4℃冰箱备用(提好的HDL需3周内用完) ......
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